相变型超声分子探针物理杀伤肝癌细胞的实验研究

来源 :重庆医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:waterlee1999
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第一部分硫酸脑苷脂修饰的液-气相转变型超声分子探针的制备及相交研究目的:制备一种新型纳米级超声分子探针一硫酸脑苷脂修饰的包裹全氟戊烷的脂质纳米粒,研究其热致相变及声致相变效果。方法:采用薄膜分散法制备硫酸脑苷脂修饰的包裹全氟戊烷(PFP)的脂质纳米粒(SL-NP),使用光学显微镜观察其形态、大小、分布等物理特征;采用激光粒度仪测SL-NP的粒径;在加热板加热情况下使用光学显微镜观察SL-NP液-气相转变情况,用低强度聚焦超声(LIFU)辐照SL-NP乳液后使用超声诊断仪观察SL-NP的声致相变(ADV)情况。结果:制备的硫酸脑苷脂修饰的包裹PFP的脂质纳米粒,其外观成白色乳液,圆球形,密度高,大小均一,分散均匀,不成团聚集,平均粒径约为(182.7±63.8)nm;当加热板温度升至44.5℃时,SL-NP开始出现液-气相转变,随着温度继续升高,相变纳米粒体积继续增大,直至破裂,同时出现新的相变纳米粒并逐渐增大。经LIFU辐照后,普通二维超声及超声造影模式下均显示脂质纳米粒回声较辐照前明显增强。结论:成功制备纳米级超声分子探针—硫酸脑苷脂修饰的包裹PFP的脂质纳米粒,并在加热及超声辐照下可发生液-气相转变。第二部分相变型超声分子探针物理杀伤肝癌细胞的实验研究目的:探讨硫酸脑苷脂修饰的包裹PFP的脂质纳米粒联合低强度聚焦超声对肝癌HepG2细胞的杀伤作用。方法:采用薄膜分散法制备不含硫酸脑苷脂的包裹PFP的脂质纳米粒(NSL-NP)和SL-NP;使用倒置荧光显微镜观察SL-NP及NSL-NP与肝癌HepG2细胞结合情况,将肝癌细胞分为靶向组(SL-NP组)、非靶向组(NSL-NP组)、空白对照组(不含L-NP组),使用LIFU (参数3W,2min)分别对各组进行辐照,尔后使用流式细胞术检测各组细胞凋亡情况,CCK-8检测各组细胞存活情况。结果:制备的NSL-NP外观成白色乳液,圆球形,密度高,大小均一,分散均匀,不成团聚集,与SL-NP相比物理特性相似;倒置荧光显微镜观察发现靶向组中SL-NP与肝癌HepG2细胞紧密结合,非靶向组中NSL-NP很少与肝癌HepG2细胞结合;经LIFU处理后,靶向组肝癌细胞凋亡率最高,为(95.86±1.96)%,存活率最低,为(49.21±3.04)%,与其他组比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:硫酸脑苷脂修饰的包裹PFP的脂质纳米粒联合低强度聚焦超声可促进肝癌HepG2细胞死亡,抑制其增殖,有望成为治疗肝癌的一种新方法。
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