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背景和目的:胶质母细胞瘤（Glioblastoma,GBM）是人脑原发恶性肿瘤中最常见的一种,恶性程度高且预后一般较差,基于手术、放疗、化疗的传统治疗方法收效甚微,难以显著延长患者中位生存期[1]。胶质母细胞瘤细胞在颅内的快速生长有赖于瘤体内部的丰富血供,营养物质及代谢产物的充分交换为肿瘤细胞增殖侵袭提供了原动力。有研究表明,胶质母细胞瘤内存在血管生成拟态（vasculogenic mimicry,VM）现象,即由肿瘤细胞本身而非血管内皮细胞形成的类血管样结构,更大程度地保障了肿瘤组织内部的血液供应[2]。形成拟态血管的肿瘤细胞同时具有上皮间质转化（epithelial-mesenchymal transition,EMT）倾向,失去上皮特性,具有间质细胞表型,这将使得肿瘤细胞在丧失极性的同时运动能力增强,细胞间黏附减弱,更容易发生侵袭转移[3]。近年来关于长链非编码RNA（long non-coding RNA,lnc RNA）在肿瘤发生发展中所起作用的研究越来越多,因首次在肝癌组织中检测出特异性高表达而得名的肝癌高表达转录本lnc RNA HULC（highly up-regulated in liver cancer）被证实在胶质母细胞瘤中同样存在异常表达。鉴于lnc RNA HULC在肝癌中所起的促癌作用,其在胶质母细胞瘤中有可能同样扮演促进肿瘤生长转移的角色,本课题组推测lnc RNA HULC对胶质母细胞瘤细胞的血管生成拟态及上皮间质转化现象有促进作用,以此推动了胶质母细胞瘤的增殖和侵袭。方法:1.培养人脑胶质母细胞瘤细胞株SHG44和U87,通过慢病毒包装及稳筛株构建,获得稳定转染的lnc RNA HULC过表达细胞株及转染空白载体的对照组细胞株。2.通过血管生成拟态（VM）实验检测细胞生成拟态血管的能力;3.通过q RT-PCR检测细胞中lnc RNA HULC,Snail,Slug,E-cadherin,N-cadherin,Vimentin,MMP2,MMP9的转录水平;4.通过Western blot检测细胞中Snail,Slug,E-cadherin,N-cadherin,Vimentin,MMP2,MMP9的蛋白表达水平。结果:1.VM实验结果示lnc RNA HULC过表达组细胞形成拟态血管结构的数量较多且完整程度较高,提示lnc RNA HULC促进细胞血管生成拟态现象发生;2.q RT-PCR结果示过表达组细胞lnc RNA HULC的表达量显著升高,提示lnc RNA HULC过表达稳转细胞系构建成功;转录因子（Snail,Slug）、间质标记物（N-cadherin,Vimentin）及基质金属蛋白酶（MMP2,MMP9）的m RNA转录水平升高,上皮标志物（E-cadherin）的m RNA转录水平降低,提示lnc RNA HULC促进细胞上皮间质转化现象发生;3.Western blot结果示转录因子（Snail,Slug）、间质标记物（N-cadherin,Vimentin）及基质金属蛋白酶（MMP2,MMP9）的蛋白表达水平升高,上皮标志物（E-cadherin）的蛋白表达水平降低,提示lnc RNA HULC促进细胞上皮间质转化现象发生;结论:lnc RNA HULC促进胶质母细胞瘤细胞的血管生成拟态和上皮间质转化。