在许多国家,卒中已成为了主要的致死原因。在中国县乡,脑血管病为第二位致死原因;在中国的大城市,脑血管病是第三位致死原因。脑卒中后的残疾及功能障碍给患者与家庭带来了极大的负担。卒中患者中大部分为缺血性卒中,少部分为出血性卒中。分布于免疫细胞、血管内皮细胞以及脑组织固有细胞等表面的跨膜TLRs可能介导脑缺血后的炎症反应。研究显示,TLR2在脑缺血后数小时即上调,可能参与了脑缺血后神经元损伤。Ziegler等研究表明,MCAO后注射抗TLR2封闭性单克隆抗体T2.5,免疫组化发现CD1 1b阳性细胞数量下降,还能抑制白细胞聚集以及小胶质细胞迁移;同时导致脑缺血后NeuN阳性细胞数量增加,提示抑制TLR2具有神经保护作用。髓样分化因子(MyD88)是TLR信号通路中的重要转导蛋白,其依赖的信号通路以及调控的基因产物在固有免疫和适应性免疫中发挥着关键作用。基质金属蛋白酶9(MMP-9)可降解脑血管周围基膜的成分从而导致BBB通透性增加,白细胞侵润、脑水肿及出血转化。目的:探讨大鼠脑缺血再灌注后,Toll样受体2(Toll-like receptor 2,TLR2)、髓样分化因子88(Myeloid differentiation factor 88,MyD88)与基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)三者之间的变化关系,以及三者在脑缺血再灌注后脑损伤形成过程中的可能作用机制。方法:制作Sprague-Dawley大鼠(250-280g)右侧大脑中动脉栓塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)2小时再灌注模型。实验共分为三组:缺血组、sham组(对照组)、T2.5处理组(大鼠MCAO 2h再灌注开始时,经颈静脉注射T2.5,剂量为0.1212μg/g)。在脑缺血再灌注后不同时间点,选取缺血组、sham组和T2.5处理组缺血侧脑组织来进行以下实验:1、MCAO 再灌注 1h、2h、3h、6h、12h、24h 六个时间点,利用 western blot来测定sham组和缺血组缺血侧大脑皮层中TLR2、MyD88及MMP-9的蛋白表达水平变化情况(每个时间点五只老鼠,n=5)。2、MCAO再灌注开始时,给予TLR2拮抗剂T2.5处置。缺血再灌注24h时,利用western blot测定缺血组和T2.5处理组缺血侧大脑皮层中TLR2、MyD88及MMP-9的蛋白表达水平变化情况(该时间点五只老鼠,n=5)。3、MCAO再灌注24h后,测定三组中的脑梗死体积(TTC染色法)、脑水肿(干湿重法)、血脑屏障(blood-brain barrier,BBB)通透性(Evan’s蓝法)以及神经功能缺损评分(每种测量五只老鼠,n=5)。结果:1、Western blot结果显示,在大鼠MCAO再灌注6h,缺血组缺血侧皮层中TLR2较sham组即开始升高,且有显著性差异(p<0.05),持续至24h(p<0.05)。2、Western blot结果显示,在大鼠MCAO再灌注6h,缺血组缺血侧皮层中MyD88较sham组即开始升高,且有显著性差异(p<0.01),持续至24h(p<0.05)。3、Western blot结果显示,在大鼠MCAO再灌注24h,缺血组缺血侧皮层中MMP-9较sham组升高,具有显著性差异(p<0.05)。4、大鼠MCAO再灌注24h,缺血组缺血侧脑组织BBB通透性,脑水肿程度,脑梗死体积及神经功能缺损评分均较sham组升高,且有显著性差异(p<0.01、p<0.01、p<0.001、p<0.001)。5、Western blot结果显示,大鼠MCAO再灌注24h,T2.5处理组与缺血组比较,TLR2、MyD88及MMP-9表达水平均降低(p<0.05)。大鼠MCAO再灌注24h,T2.5处理组BBB通透性、脑水肿程度、脑梗死体积、神经功能缺损评分均较缺血组下降,且均有显著性差异(p<0.01、p<0.05、p<0.01、p<0.01)。结论:1、脑缺血再灌注后6h,TLR2及MyD88即开始上升;脑缺血再灌注后24h,MMP-9才开始上升,以上因素可能通过增加BBB通透性,参与了脑水肿、脑梗死及神经功能损伤。2、TLR2拮抗剂T2.5可能通过拮抗TLR2-MyD88信号通路,减少MMP-9的表达,从而减轻BBB通透性,缓解脑水肿、减少脑梗死及修复神经功能,最终改善缺血再灌注脑损伤。