【摘 要】
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本工作主要是研究功能化的纳米复合材料(去甲氧基氨基化聚乙二醇(mPEG)、功能化的多壁碳纳米管(fMWCNTs)和离子液体(IL))与多种氧化还原蛋白(大分子生物葡萄糖氧化酶(GluOx)、过氧化氢酶
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本工作主要是研究功能化的纳米复合材料(去甲氧基氨基化聚乙二醇(mPEG)、功能化的多壁碳纳米管(fMWCNTs)和离子液体(IL))与多种氧化还原蛋白(大分子生物葡萄糖氧化酶(GluOx)、过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)和小分子生物肌红蛋白(Myo)、血红蛋白(Hb))的通用型直接电化学。研究这几种典型的氧化还原蛋白质的直接电化学不仅可以直接反映蛋白质与电极之间的氧化还原的性能,还可以研究生物分子界面的效应、相互作用、药理等等,为以后创建新型传感器、研究通用型的电化学起到了一定的参考或指导意义。去甲氧基聚乙二醇中的氨基、多壁碳纳米管中的羧基和离子液体可能具有更好的协同作用,从而更有效地调节功能化复合高分子膜的疏水性、稳定性、导电性和生物相容性。并且利用循环伏安法(CV)、电化学阻抗光谱法(EIS)、紫外可见分光光度计(UV-Vis)、透射电子显微镜(TEM)和荧光光谱法对功能化的纳米复合膜进行了表征。选取50 mM、pH 7.0的磷酸盐缓冲溶液(PBS)在同一条件下获得葡萄糖氧化酶、过氧化氢酶、超氧化物歧化酶、肌红蛋白、血红蛋白在功能化的纳米复合材料修饰玻碳电极上有一对较好的、准可逆的氧化还原峰,并且得到它们的势电式和电子转移速率常数(ks)分别为:-0.27 V和6.5 s-1,-0.13 V和3.18 s-1,-0.14 V和2.17 s-1,-0.39 V和3.37 s-1,-0.38 V和8.79 s-1;还获得了它们在玻碳电极表面的电化学活性物质密度Γ分别为:6.23×10-10mol·cm-2、1.63×10-9mol·cm-2、4.5×10-9mol·cm-2、5.6×10-9mol·cm-2和2.9× 10-9 mol·cm-2。在葡萄糖氧化酶直接电化学研究基础上,进一步研究,NF/GluOx/IL/mPEG-fMWCNTs/GCE在50 mM的磷酸盐缓冲溶液中最适pH为7,在此条件下NF/GluOx/IL/mPEG-fMWCNTs/GCE可以识别和检测葡萄糖,获得检测物质葡萄糖的检测线性范围为20到950 μM,最小检测限为0.2 μM,成功的构建了检测葡萄糖的新型传感器。全修饰电极 NF/GluOx/IL/mPEG-fMWCNTs/GCE 的表观米氏常数Michaelis-Menten(Kmapp)是 143 μM。此外还对 NF/GluOx/IL/mPEG-fMWCNTs/GCE 电极进行了实际样品检测、稳定性和抗干扰性实验。IL/mPEG-fMWCNTs功能化的纳米复合材料不仅可以保护GluOx的构象结构和催化活性,并且使生物传感器对葡萄糖的识别和检测具有较高的敏感性、稳定性和选择性。
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