【摘 要】
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克伦特罗(CLB)属β2-兴奋剂,具有“营养再分配效应”,可提高畜禽产品的瘦肉率,故常被不法分子应用于畜禽养殖过程中。喹诺酮类药物是畜禽和水产养殖中常用的抗菌药。长期食用
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克伦特罗(CLB)属β2-兴奋剂,具有“营养再分配效应”,可提高畜禽产品的瘦肉率,故常被不法分子应用于畜禽养殖过程中。喹诺酮类药物是畜禽和水产养殖中常用的抗菌药。长期食用残留此二类药物的食品会对人体健康带来损害。因此,建立对该二类药物具有特异性好、灵敏度高的检测新型方法对保证我国的食品安全具有重要意义。本文基于分子印迹技术分别建立了 CLB仿生酶联免疫检测方法和喹诺酮类药物多残留上转换荧光探针检测方法,为提高我国食品安全检测水平提供了技术支持。通过CLB和甲基丙烯酰氯反应合成了克伦特罗二取代衍生物,并通过核磁、质谱等方法对CLB衍生物进行了表征。以CLB衍生物为复合功能单体,乙二醇二甲基丙烯酸酯为交联剂,偶氮二异丁腈为引发剂,通过紫外引发聚合直接在96孔酶标板孔中制备了对CLB具有选择性识别能力的分子印迹聚合物仿生抗体,优化了聚合条件,并对聚合物的选择性和再生性能进行了考察。结果显示,制备的MIPs仿生抗体对于CLB具有较好的选择性和吸附性能,以该分子印迹为仿生抗体建立的仿生免疫检测方法的线性范围为10-5~103 μg/L,最低检测限为10-7 μg/L,实际样品猪肉和饮用水中CLB添加回收实验的平均回收率分别为86.02~103.00%和80.7~110.0%。该方法操作简单、快速、灵敏度高,能满足对痕量CLB检测的需求。将具有特异选择性的分子印迹聚合物与上转换荧光材料、Fe304磁性纳米粒子相结合,以恩诺沙星为模板分子,以甲基丙烯酸为功能单体,乙二醇二甲基丙烯酸酯为交联剂,二苯甲酮为引发剂,采用表面印迹法成功制备了喹诺酮类分子印迹聚合物荧光探针。利用SEM、XRD、能谱分析、红外光谱等方法对制备的荧光探针进行了表征。吸附实验结果表明,合成的分子印迹荧光探针具有较高的吸附容量,较好的选择性,较快的传质速率(浓度为60μg/L时,15 min可达到吸附平衡)以及稳定的光化学特性(荧光达到稳定后至少可维持1h)。该荧光探针对5种喹诺酮类药物具有显著的荧光猝灭效应,并在最优条件下建立了对该5种喹诺酮类药物的标准曲线。在对实际样品大菱鲆进行添加回收实验中,该方法的平均回收率为90.33~108.43%,相对标准偏差(RSD)小于5.53%。该方法简单、快速、检测费用低,适用于鱼类等样品中喹诺酮类药物多残留检测分析。
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