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本研究以纯化的犬瘟热病毒(CDV)F蛋白免疫BALB/c小鼠，运用淋巴细胞杂交瘤技术进行细胞融合，并用间接ELISA方法进行筛选，用IFA、Western-blot对各株抗CDVF蛋白单克隆抗体进行生物学特性鉴定。结果获得7株单克隆抗体具有对CDV的特异性，分别命名为:2D6，3E10，3A2，5B7，5F6，6H8，9B6;单抗亚类鉴定结果分别为IgG2a，IgG1，IgG2b，IgG1，IgG1，IgG2a和IgG1;各株腹水单克隆抗体的ELISA效价为1∶2000～1∶16000;经细胞中和试验初步证实2株单抗(5B7、9B6)具有中和犬瘟热病毒感染Vero细胞的作用，中和效价分别为1∶320和1∶640;各株单抗亲和力测定结果为:2D6＞6H8＞3E10＞5F6＞3A2＞9B6＞5B7;液相相加试验证实7株单抗的作用位点不同，其中2D6，5F6的作用位点非常相近。
本研究采用饱和硫酸铵盐析和Sephadex G-200柱层析法从细胞培养物中纯化CDV，经紫外分光光度计测定，其浓度为1.292mg/mL。并以此为抗原免疫兔子，制备高免血清并提纯IgG。兔抗CDV高免血清琼扩效价为1∶32时收集血清，经饱和硫酸铵盐析和Sephadex G-50纯化，兔抗CDV IgG蛋白浓度为8.246mg/mL。
选取2D6和制备的CDV IgG建立了检测CDV的抗原捕获ELISA方法并对其反应条件进行优化。兔抗CDV IgG、McAb、HRP-羊抗鼠最佳稀释度分别为1∶3200、1∶200、1∶800倍稀释。封闭液、抗体稀释液分别为1％BSA、0.1％BSA;该检测方法特异、可靠、方便、快捷，不需要特殊设备和技术，便于推广。