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目的：1.探讨二甲双胍对乳腺癌细胞MDA-MB-231和MCF-7侵袭迁移的影响。2.研究二甲双胍刺激乳腺癌细胞MDA-MB-231和MCF-7后对miR-625表达的影响。3.通过转染miR-625的模拟物及抑制物来探讨其对乳腺癌细胞MDA-MB-231和MCF-7的侵袭迁移的影响。4.检测miR-625转染两株细胞后侵袭迁移相关蛋白及靶基因蛋白的变化，探讨靶基因的调控机制。方法：1.研究以侵袭迁移能力较强的乳腺癌细胞MDA-MB-231及侵袭迁移能力较弱的乳腺癌细胞MCF-7为研究对象，使用不同浓度的二甲双胍作用于乳腺癌细胞，48h、72h后采用MTT比色法检测细胞增殖抑制作用，并据此结果选择对细胞增殖影响较小的浓度进行以下的侵袭迁移实验。2.通过Transwell实验检测二甲双胍对乳腺癌细胞MDA-MB-231和MCF-7侵袭迁移的影响，同时使用qRT-PCR检测二甲双胍作用于两株细胞后miR-625的表达。3.利用qRT-PCR方法检测两株细胞中miR-625的表达量。4.以miR-625为检索词，通过靶基因预测软件TargetScan、PicTar、miRanda和miRbase预测出靶基因，并通过Western blot实验检测靶基因蛋白的变化。5.根据两株细胞miR-625表达量的差异，将miR-625的模拟物转染至乳腺癌细胞MDA-MB-231，miR-625的抑制物转染至乳腺癌细胞MCF-7，利用Transwell实验和细胞划痕实验检测其对细胞侵袭迁移的影响。6.将miR-625转染细胞后，利用Western blot实验检测侵袭转移相关蛋白TIMP1和上皮间质细胞转化(epithelial-mesenchymal transition，EMT)蛋白的变化及初步验证miRNA对靶基因的调控作用。结果：1.二甲双胍对乳腺癌细胞MDA-MB-231和MCF-7增殖及侵袭迁移作用的影响MTT结果显示，二甲双胍能明显的抑制乳腺癌细胞MDA-MB-231和MCF-7的增殖能力，而且抑制活性随着药物浓度和作用时间的增加而增强，较小浓度的二甲双胍(2mmol·L-1)在一定的程度上可以抑制两株乳腺癌细胞的侵袭迁移能力(P<0.05)。2.二甲双胍影响乳腺癌细胞MDA-MB-231和MCF-7细胞中miR-625的表达用二甲双胍刺激乳腺癌细胞MDA-MB-231和MCF-748h后，提取细胞microRNA，通过qRT-PCR检测miR-625的表达量，结果显示，二甲双胍作用于细胞后miR-625的表达量显著增高。3.乳腺癌细胞MDA-MB-231、MCF-7中miR-625的表达量qRT-PCR检测乳腺癌细胞MDA-MB-231、MCF-7中miR-625的表达量，根据2-△△Ct值进行统计学分析，结果显示：MDA-MB-231细胞和MCF-7细胞中miR-625的表达量有显著的差异，MCF-7细胞中miR-625的表达量显著高于MDA-MB-231细胞，差异具有统计学意义(P<0.05)。4. miR-625靶基因的预测及验证miR-625相关靶基因的生物信息学预测，通过常用的靶基因预测软件预测出与miR-625相互作用的靶基因，根据数据库结果显示，发现SCAI正是我们的目标靶基因，因此我们就选择SCAI进行预测的鉴定。5. miR-625转染后对乳腺癌细胞MDA-MB-231、MCF-7侵袭转移的影响根据qRT-PCR显示，乳腺癌细胞MDA-MB-231中miR-625的表达量相对较低，而乳腺癌细胞MCF-7中的表达量相对较高，所以我们将miR-625模拟物转染到MDA-MB-231细胞中，miR-625抑制物转染到MCF-7细胞中，Transwell实验结果显示MDA-MB-231细胞中，miR-625组与NC组相比细胞穿膜数目并没有显著变化，而MCF-7细胞中，anti-miR-625组相对anti-NC组细胞穿膜数目显著增多，划痕实验显示：转染miR-625模拟物的MDA-MB-231细胞的迁移能力较阴性对照组相比变化不明显，转染miR-625抑制物的MCF-7细胞迁移能力较阴性对照组明显增强，差异具有统计学意义(P<0.05)。6. Western blot实验检测miR-625转染后靶基因蛋白及侵袭转移相关蛋白的变化通过上述Transwell实验可知，miR-625在乳腺癌细胞MCF-7中可能起到了抑制其侵袭迁移的作用，Western blot检测可知转染miR-625抑制物的乳腺癌细胞MCF-7，48h后靶基因SCAI蛋白明显降低，TIMP1蛋白明显降低， EMT相关蛋白E-cadherin降低，提示有可能也诱导出现了EMT。结论：1.二甲双胍能够抑制乳腺癌细胞MDA-MB-231和MCF-7的侵袭迁移能力，而且可以使miR-625的表达升高。2. miR-625在高侵袭能力的乳腺癌细胞MDA-MB-231中低表达，在侵袭能力相对较弱的乳腺癌细胞MCF-7中低表达。3. miR-625在乳腺癌细胞MCF-7低表达时，在体外能有效的抑制乳腺癌细胞的侵袭迁移能力，表明miR-625发挥着抑制细胞侵袭迁移的作用。4. miR-625通过调控靶基因SCAI抑制乳腺癌细胞MCF-7的侵袭迁移能力。