本研究分为二部分：　　 第一部分：小鼠骨髓源性肥大细胞的培养及鉴定　　 目的：利用小鼠骨髓干细胞体外诱导肥大细胞。　　 方法:从小鼠股骨获得骨髓细胞，放入含10[％]胎牛血清的RPMI1640 培养基中，加入三种不同浓度的刺激因子，即IL-3和SCF均为10ng/ml，15ng/ml 或20ng/ml，放入二氧化碳培养箱中培养4周，用免疫组化法观察CD117的表达，流式细胞术检测CD117和FcεRIα双阳性细胞的比例，甲苯胺蓝染色法观察细胞的成熟度，并与较常用的肥大细胞系P815做比较。　　 结果:小鼠股骨骨髓细胞经三种浓度的刺激因子诱导4周后均可获得肥大细胞，10ng/ml和15ng/ml的因子作用后，流式细胞术检测所得细胞：CD117和FcεRIα双阳性的肥大细胞纯度大于95[％]，而20ng/ml时FcεRIα的表达却有所降低，双阳性的细胞仅达90[％]，而P815细胞系几乎不表达FcεRIα。免疫组化检测显示：培养获得的细胞大部分均表达CD117。甲苯胺蓝染色发现培养获得的肥大细胞核被染成深蓝色，胞浆中布满大量紫红色的颗粒，呈现肥大细胞的典型特征；而P815却少见典型的紫红色异染颗粒。　　 结论:用IL-3和SCF各10ng/ml可在体外成功诱导高纯度的小鼠骨髓源性肥大细胞，且其在表型和成熟度方面均优于P815细胞系。　　 第二部分：小鼠骨髓源性肥大细胞体外诱导调节性T细胞的产生及机制探讨　　 目的：探索小鼠骨髓源性肥大细胞能否在体外诱导CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞，并分析其可能机制。　　 方法：从小鼠股骨获取骨髓细胞，用IL-3和SCF各10ng/ml(完全RPMI 1640培养基)诱导四周。用甲苯胺蓝染色法观察肥大细胞异染颗粒；流式细胞术检测CD117和FcεRIα双阳性细胞比例。将肥大细胞与同基因来源的T细胞按不同比例(1：2，1：1，2：1)置于48孔培养板中培养，作为三个实验组；未加肥大细胞的单独T细胞组作对照组。四个组均加入CD3 抗体和CD28 抗体各2μg/ml，IL-2 1000U/ml，5天后流式检测Foxp3的表达情况；RT-PCR，免疫组化法检测肥大细胞中TGF-β1的表达。在上述混培体系中加入TGF-β1中和性抗体(1ug/ml)，5天后流式检测Foxp3的表达情况。　　 结果：与对照组相比，三个实验组的Foxp3表达均升高(对照组：3.37％±0.40[％]；　　 三个实验组依次为：8.23％±0.80[％]，10.87％±1.25[％]，13.63％±0.55[％])。且随着肥大细胞比例的增加Foxp3+细胞的比例也增加。RT-PCR和免疫组化均观察到TGF-β1的表达。而当加入TGF-β1中和性抗体后，Foxp3+细胞的比例明显下降(三个实验组依次为：4.47[％]±0.50[％]，6.13[％]±0.35[％]，6.40[％]±0.26[％])。　　 结论：肥大细胞能在体外诱导T细胞转化为CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞，而肥大细胞分泌的TGFβ1可能是参与该诱导过程的一种重要介质。