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近年来细胞凋亡成为翼状胬肉发病机制的研究热点。本研究通过检测新的凋亡抑制因子survivin在翼状胬肉中术前及术后的表达,分析其与bcl-2、p53、caspase-3凋亡相关蛋白表达及细胞增殖指数、凋亡指数的关系,同时对照比较术前、术后的BUT值,试图说明survivin在翼状胬肉的发生及复发中具有的作用,为深入理解细胞凋亡参与翼状胬肉的发生发展提供一些可靠的依据。
第一部分 survivin在翼状胬肉和变性结膜中的表达及意义
目的:分析survivin在翼状胬肉和变性结膜中的表达及其与bcl-2、p53、caspase-3蛋白表达、泪膜功能的关系,探讨survivin在翼状胬肉中对细胞凋亡、增殖的影响。
方法: RT-PCR检测5例翼状胬肉、5例变性结膜及5例正常结膜中survivin mRNA的表达,免疫组织化学方法检测40例翼状胬肉、15例变性结膜、20例正常结膜中survivin、bcl-2、p53、caspase-3、PCNA蛋白的表达,用PCNA阳性表达率评估细胞增殖指数PI,用TUNEL原位末端标记法检测细胞凋亡指数AI;各组患者均测量并记录BUT。
结果:(1)翼状胬肉、变性结膜、正常结膜组织中survivin蛋白的阳性表达率分别为:67.50%、26.67%、0.00%,三组比较差异显著。(2)Survivin蛋白阳性表达组的bcl-2、p53蛋白的阳性表达率均显著高于survivin蛋白阴性表达组,而caspase-3蛋白的阳性表达率显著低于survivin蛋白阴性表达组。(3)Survivin蛋白阳性表达组的PI值显著高于survivin蛋白阴性表达组,而AI值显著低于survivin蛋白阴性表达组。(4)翼状胬肉组的BUT值显著小于正常结膜组及变性结膜组。Survivin蛋白阳性表达组的BUT值显著小于survivin蛋白阴性表达组。
结论: Surivivin在翼状胬肉、变性结膜中表达,尤其在翼状胬肉中高表达,而在正常结膜中不表达;Surivivin与bcl-2、p53、caspase-3协调抑制细胞凋亡;翼状胬肉的发生、发展可能与survivin的异常表达并引起细胞凋亡和增殖失衡以及泪膜稳定性下降有关。
第二部分 survivin 在复发及未复发翼状胬肉中的表达及意义
目的:观察和检测survivin、bcl-2、p53、caspase-3在复发及未复发翼状胬肉中的表达及差异,以及它们对翼状胬肉复发的影响,探讨泪膜稳定性及细胞凋亡在翼状胬肉复发中的意义。
方法:随访第一部分的翼状胬肉患者术后3个月,用免疫组织化学方法检测8例复发翼状胬肉、8例未复发翼状胬肉中survivin、bcl-2、p53、caspase-3、PCNA蛋白的表达,用PCNA阳性表达率评估细胞增殖指数PI,用TUNEL原位末端标记法检测细胞凋亡指数AI;各组患者均测量并记录BUT。
结果:(1)复发组survivin、bcl-2、p53蛋白的阳性表达率及PI值均显著高于未复发组,BUT值、AI值均显著低于未复发组。(2)Survivin、bcl-2、p53、caspase-3蛋白阳性表达组与阴性表达组比较,术后复发率差异无统计学意义。(3)复发组PI、AI值术前与术后比较差异不显著;未复发组PI值术后显著减小,AI值术后显著增大;(4)复发组BUT值较术前减小,未复发组BUT值较术前增大,差异均有统计学意义。
结论:翼状胬肉中survivin、bcl-2、p53 、caspase-3蛋白的表达与其术后复发率无明显相关性。复发性翼状胬肉survivin、bcl-2、p53蛋白阳性表达率高,细胞凋亡增殖失衡、泪膜稳定性差,而未复发的翼状胬肉survivin、bcl-2、p53蛋白的表达下调,细胞凋亡增殖趋于平衡,泪膜稳定性明显改善。