目的:明确神经粘附分子Robo4在胶质瘤中的表达变化,揭示其对胶质瘤血管内皮细胞增殖、迁移、血管生成能力的影响及其可能机制。方法:首先,在GEO数据库中分析Robo4在血管生成基因表达谱中的表达情况及功能富集分析。其次,应用Real-time PCR和Western blot分别检测在单独胶质瘤U87、U118细胞、人脐静脉血管内皮细胞及胶质瘤与人脐静脉血管内皮细胞共培养组中Robo4的表达变化;设计合成针对Robo4基因的过表达慢病毒,转染至人脐静脉血管内皮细胞,细胞分为Robo4基因过表达组(转染组)、不带任何基因的空病毒转染组(转染对照组)、不经任何处理组(空白对照组)。细胞增殖实验CCK-8检测过表达Robo4对胶质瘤条件培养液中人脐静脉血管内皮细胞增殖的影响,采用细胞划痕实验检测过表达Robo4对胶质瘤条件培养液中人脐静脉血管内皮细胞迁移能力的影响,通过Matrigel基质胶成管实验,观察过表达Robo4对胶质瘤条件培养液中人脐静脉血管内皮细胞成管能力的影响变化。最后,Western blot检测内皮细胞感染Robo4后对Arf6和Rac1蛋白表达影响。结果:根据生物信息分析结果:Robo4是组织血管生成中的差异表达基因。差异表达基因Robo4在血管生成、调节细胞增殖和迁移、肿瘤通路、轴突导向通路等方面均显著富集。在胶质瘤上清液培养的内皮细胞与正常培养基培养的内皮细胞相比,Robo4表达明显下调(P<0.05),Robo4为胶质瘤血管内皮细胞的抑制基因。细胞增殖实验示:与转染对照组和空白对照组比较,各时间点Robo4过表达组明显抑制胶质瘤条件下内皮细胞的增殖(P<0.05),细胞划痕实验结果显示:Robo4过表达组细胞愈合面积比转染对照组和空白对照组减少(P<0.05)。Matrigel基质胶成管实验中,Robo4过表达组成管的数量显著减少且结构松散(P<0.05)。Western blot表明:Robo4过表达组可明显抑制Arf6和Racl蛋白的表达。结论:Robo4在胶质瘤血管内皮细胞表达,而非胶质瘤U87、U118细胞中表达。胶质瘤细胞上清液培养的人脐静脉血管内皮细胞中,Robo4可显著抑制人脐静脉血管内皮细胞的增殖、迁移及血管生成,机制可能与调节Robo4-Arf6-Rac1信号通路有关。