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研究背景：
白血病(leukemia)是造血系统的恶性肿瘤。恶性肿瘤中以白血病的发病率最高,15岁以下白血病发生率为4/10万左右,其中90％以上为急性白血病(AL),急性淋巴细胞白血病(ALL)约占2/3,急性非淋巴细胞白血病(ANLL)约占1/3。近20年来,由于化疗的不断改进,ALL患儿的5年无病生存率达70％-80％,ANLL的5年无病生存率在50％以上。虽然化疗方案的不断改进,使小儿白血病的疗效得到提高,但白血病仍是儿童疾病相关死亡的主要原因。因此许多研究者仍努力地寻求疗效更好,安全性更高的,副作用更少和更加个体化的治疗方案。
白血病的发病与机体的免疫功能密切相关,对人体免疫系统功能研究的不断深入,将会为白血病的治疗带来新的突破,免疫治疗是目前白血病治疗研究的一个热点。近几年的研究表明调节性T细胞也是参与肿瘤免疫抑制的一个重要部分。常见的免疫调节细胞包括CD4+CD25+T(regulatory T cells,Tregs),Tr1,Th3,CD8+CD28-T细胞等,其中CD4+CD25+调节T细胞在维持免疫系统稳定等方面具有重要作用。2001年,June[1]在非小细胞肺癌和卵巢癌中观察到Tregs的升高,此后,不同研究者[2-10]观察到在多种肿瘤如乳腺癌,结肠癌,食管癌,胃癌,肝癌,白血病,淋巴瘤,黑色素瘤,卵巢癌,胰腺癌患者外周血中Tregs增高,并且在体外实验证明有免疫抑制功能,推测增高的Tregs抑制了肿瘤相关抗原(TAA)特异性免疫。肿瘤患者的CD4+CD25+Tregs细胞可抑制T细胞的增殖和活性,以及NK细胞介导的细胞毒作用,有利于肿瘤的生长和转移,对免疫治疗起负调节作用,是肿瘤免疫抑制的又一机制。
研究目的：
1.探讨依靠CD4+CD25+Tregs细胞表面抗原标志客观划分CD4+CD25+Tregs细胞的方法。
2.通过检测急性白血病患儿外周血CD4+CD25+Tregs细胞和NK细胞,对Tregs在急性白血病肿瘤免疫中的作用进行初步探讨。
研究方法：
选择16例初诊急性白血病患儿,16例急性白血病缓解患儿和13例健康体检者,采集外周血。应用流式细胞仪测外周血CD4+CD25+Tregs细胞和NK细胞含量；其中部分患者于初诊及化疗完全缓解两个时间点分别采血。
研究结果：
1.初诊患儿、完全缓解患儿及健康体检者外周血CD4+CD25hiT细胞占CD4+T细胞的比例分别为4.180±1.387％,2.976±1.451％和1.487±0.578％,初诊组和缓解组患儿高于正常对照组(p<0.05),且初诊患儿组高于完全缓解患儿组(p<0.05)。
2.与对照比较,ALL患儿的NK细胞数量减少,完全缓解后一年内患儿组其NK细胞数量仍低于正常对照。完全缓解大于一年的患儿组与对照组的差别无统计学意义。
3.CD4+CD25hi T细胞和CD4+CD25hi-intCD127int-lowT细胞可较好的反映Tregs的比例。在联合用CD4,CD25和CD127分析Tregs时,在等高线图(contourplot)上分析较散点(dot plot)图分析更直观。
结论：
1.急性白血病患儿外周血中Tregs数量升高,NK细胞数量降低,提示Tregs可能在白血病的发生、发展中起一定作用,参与NK细胞的调节可能是Tregs在白血病免疫的其中一个环节,Tregs与NK细胞的关系以及其与白血病发生、发展的关系值得进一步的深入探讨,对以调节NK细胞为主的白血病免疫治疗可提供一定的实验参考。
2.目前的检测方法中检测CD4+CD25hi T细胞和CD4+CD25hi-intCD127int-lowT细胞可较好的反映Tregs的比例。在联合用CD4,CD25和CD127分析Tregs时,在等高线图(contour plot)上分析较散点(dot plot)图分析更直观。