丹参酮ⅡA对腹膜透析液诱导的腹膜间皮细胞氧化应激及损伤的影响

来源 :南京大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:falaong
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:研究丹参酮ⅡA对腹膜透析液(peritoneal dialysis fluid, PDF)诱导人腹膜间皮细胞(human peritoneal mesothelial cells,HPMCs)氧化应激及其损伤的影响。初步探讨丹参酮ⅡA在防治腹膜透析(Peritoneal Dialysis,PD)相关腹膜间皮细胞氧化应激损伤(oxidative stress reaction and its damage)的作用机制。方法:体外培养的HPMCs细胞株,待细胞80%融合后用1%小牛血清(FBS)培养基同步24小时,倒置显微镜观察细胞生长状态,并分为五组:A组即对照组(DMEM培养基+完全培养基);B组即腹膜透析液组(含4.25%PDF的完全培养基);C组即丹参酮组(含100μMmol/L丹参酮的完全培养基);D组即丹参酮1组(含50μ/L丹参酮ⅡA的PDF)、E组即丹参酮2组(含100μMol/LⅡA丹参酮ⅡA的PDF)。干预48小时后(PDF未加热),收集各组上清液,离心后硫代巴比妥酸法、黄嘌呤氧化酶法、二硫代二硝酸苯甲酸显色法于分光光度以上检测各组上清液MDA、SOD、GSH浓度,并进行比较。不同浓度丹参酮ⅡA(50μMol/L、100μMol/L、200μMol/L)干预48h后,MTT比色法于酶标仪上检测不同浓度丹参酮ⅡA干预下细胞增殖活力的改变;干预72h后(其中B组、D、E组为加热的PDF)。采用活性氧捕获剂双氢-乙酰乙酸二氯荧光黄孵育细胞,通过流式细胞仪检测细胞内的荧光强度而测得细胞内活性氧水平。流式细胞仪及荧光显微镜检测线粒体膜电位的变化:荧光显微镜检测胞内钙离子浓度的变化。结果:倒置显微镜下观察对数期生长的HPMCs呈铺路石样改变,符合文献报道的HPMCs生长状态。不同浓度丹参酮ⅡA干预24小时后,组间对腹膜间皮细胞增值活性的影响无显著差异(P>0.05)。PDF干预24小时候,B组上清液丙二醛含量显著高于A、C、D组,P<0.01,差异有显著统计学意义;B组(SOD)超氧化物歧化酶、GSH(谷胱甘肽)水平较A、C、D组显著下降P<0.01(差异有显著统计学意义);干预72小时后,B细胞内活性氧水平显著高于A、C、D组P<0.01;荧光显微镜显示线粒体膜电位A组以红色荧光为主,B线粒体膜电位水平显著降低(以绿色荧光逐渐增强),丹参酮ⅡA干预后,线粒体膜电位红色荧光逐渐增强,绿色荧光逐渐减弱;流式细胞仪检测结果(以线粒体膜电位下降的程度表示),B组显著高于A、C、D组,P<0.01(有显著统计学意义)。B组胞内钙离子水平较对照组及D、E组显著增加,P<0.01,结论:由此可见:丹参酮ⅡA在一定浓度范围内不影响对腹膜间皮细胞的增值活性;且可显著降低PDF干预下的HPMCs活性氧的产生及降低MDA的含量及胞内钙离子的负荷,保护SOD、GSH的活性,防止线粒体膜电位的降低,从而提示丹参酮ⅡA具有潜在阻止PDF干预下HPMCs氧化应激损伤的作用。
其他文献
学位
材料来源供试材料共279份,其中长城沿线风沙区42份,陕北丘陵沟壑区71份,渭北塬区36份,关中灌区9份,秦岭山区60份,巴山山区54份,汉中盆地7份。结果讨论 (一)高粱的生态分布 1
花生蚜虫又叫豆蚜、槐蚜、苜蓿蚜,近几年连续发生为害,1981年大发生,一般减产10—30%,严重的达50%以上。为了控制其为害,1981—1984年我们进行了药剂防治试验,现简报如下。 一
水稻恶苗病近来成为我区影响水稻产量的严重病害。1979年前后,曾在早金凤5号等品种上严重发生,病苗率高达43.4%。1981年又在杂交稻的威优系统上严重危害,勉县东风公社发病面
学位
学位
山西省农科院土肥所利用作物秸秆和棉籽壳生料栽培草菇。接种后15天即可收获第一茬子实体,出菇率达26%。此法具有原料广、成本低、省工、经济效益高等优点,每100 Shanxi Aca
学位
细绿萍(A20砌厅妇“髓娩s Lam)。又名蕨状满江红,原野生f:美隧稽懿趟弼拉嬲慨 , _ 以及南部}!}州。1978年冬口I入浙北地区,水稻田养殖细绿萍12万卣。镞譬产实践群越嚣 观察.
第一部分:南京地区五岁以下儿童常见腹泻病毒的分子流行病学研究目的:通过病例对照研究以了解2010-2011年度南京地区四种常见腹泻病毒在五岁以下儿童中的分子流行病学特征,为小