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目的:研究丹参酮ⅡA对腹膜透析液(peritoneal dialysis fluid, PDF)诱导人腹膜间皮细胞(human peritoneal mesothelial cells,HPMCs)氧化应激及其损伤的影响。初步探讨丹参酮ⅡA在防治腹膜透析(Peritoneal Dialysis,PD)相关腹膜间皮细胞氧化应激损伤(oxidative stress reaction and its damage)的作用机制。方法:体外培养的HPMCs细胞株,待细胞80%融合后用1%小牛血清(FBS)培养基同步24小时,倒置显微镜观察细胞生长状态,并分为五组:A组即对照组(DMEM培养基+完全培养基);B组即腹膜透析液组(含4.25%PDF的完全培养基);C组即丹参酮组(含100μMmol/L丹参酮的完全培养基);D组即丹参酮1组(含50μ/L丹参酮ⅡA的PDF)、E组即丹参酮2组(含100μMol/LⅡA丹参酮ⅡA的PDF)。干预48小时后(PDF未加热),收集各组上清液,离心后硫代巴比妥酸法、黄嘌呤氧化酶法、二硫代二硝酸苯甲酸显色法于分光光度以上检测各组上清液MDA、SOD、GSH浓度,并进行比较。不同浓度丹参酮ⅡA(50μMol/L、100μMol/L、200μMol/L)干预48h后,MTT比色法于酶标仪上检测不同浓度丹参酮ⅡA干预下细胞增殖活力的改变;干预72h后(其中B组、D、E组为加热的PDF)。采用活性氧捕获剂双氢-乙酰乙酸二氯荧光黄孵育细胞,通过流式细胞仪检测细胞内的荧光强度而测得细胞内活性氧水平。流式细胞仪及荧光显微镜检测线粒体膜电位的变化:荧光显微镜检测胞内钙离子浓度的变化。结果:倒置显微镜下观察对数期生长的HPMCs呈铺路石样改变,符合文献报道的HPMCs生长状态。不同浓度丹参酮ⅡA干预24小时后,组间对腹膜间皮细胞增值活性的影响无显著差异(P>0.05)。PDF干预24小时候,B组上清液丙二醛含量显著高于A、C、D组,P<0.01,差异有显著统计学意义;B组(SOD)超氧化物歧化酶、GSH(谷胱甘肽)水平较A、C、D组显著下降P<0.01(差异有显著统计学意义);干预72小时后,B细胞内活性氧水平显著高于A、C、D组P<0.01;荧光显微镜显示线粒体膜电位A组以红色荧光为主,B线粒体膜电位水平显著降低(以绿色荧光逐渐增强),丹参酮ⅡA干预后,线粒体膜电位红色荧光逐渐增强,绿色荧光逐渐减弱;流式细胞仪检测结果(以线粒体膜电位下降的程度表示),B组显著高于A、C、D组,P<0.01(有显著统计学意义)。B组胞内钙离子水平较对照组及D、E组显著增加,P<0.01,结论:由此可见:丹参酮ⅡA在一定浓度范围内不影响对腹膜间皮细胞的增值活性;且可显著降低PDF干预下的HPMCs活性氧的产生及降低MDA的含量及胞内钙离子的负荷,保护SOD、GSH的活性,防止线粒体膜电位的降低,从而提示丹参酮ⅡA具有潜在阻止PDF干预下HPMCs氧化应激损伤的作用。