苹果轮纹病与桃褐腐病分别是由子囊真菌Botryosphaeria dothidea和Monilinia fructicola引起的重要病害,对农业造成重大经济损失。小檗碱作为植物源杀菌剂,应用前景十分广阔。本文围绕小檗碱及其复配剂的药效评价、小檗碱作用靶标的探究及小檗碱烟剂的研制三个方面开展实验,研究小檗碱对苹果轮纹病菌和桃褐腐病菌的抑制作用,并研制小檗碱新剂型。1.小檗碱、405-1、405-2、腐霉利、苯醚甲环唑抑制苹果轮纹病菌的EC50 值分别为 8.85 μg/mL、5.45 μg/mL、2.42 μg/mL、0.55 μg/mL、0.086μg/mL;抑制桃褐腐病菌的EC50值分别为8μg/mL、1.35 μg/mL、0.59μg/mL、0.35 μg/mL、0.0635 μg/mL。对苹果轮纹病菌,当小檗碱与 405-1复配比为5:1时,产生增效作用;对桃褐腐病菌,当小檗碱与405-2复配比为5:1时,产生增效作用。2.发现烯醇化酶可能为小檗碱抑制桃褐腐病菌的作用靶标,克隆得到烯醇化酶基因,该基因编码序列(CDS)全长1317 bp,是一个完整的ORF,编码438个氨基酸。成功构建重组大肠杆菌pET-28a-ENO/BL21,其表达条带的大小与预测的分子质量相符。3.成功构建重组毕赤酵母pPIC9K-ENO/GS115及丝状真菌表达载体,为验证烯醇化酶是否为小檗碱抑制桃褐腐病菌的作用靶标奠定了基础。4.首次研制出小檗碱烟剂,其组成(%)为:10%小檗碱原药,30%燃料A,45%助燃剂B,10%发烟剂C,5%降温剂D。按烟剂产品标准HG-T2467.19-2003测定了小檗碱烟剂的各项理化指标。