油松毛虫性信息素的结构鉴定和诱芯载体中释放速率的研究

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油松毛虫(Dendrolimus tabulaeformis Tsai and Liu),属鳞翅目,枯叶蛾科(Lepidoptera: Lasiocampidae),是中国北方最重要的林业食叶害虫之一。爆发时常造成松林大面积死亡。近些年来应用性信息素进行种群监测和交配干扰是控制这些害虫的重要方法。本试验中应用顶空吸附-固相微萃取(Headspace-solid phase microextraction, HS-SPME)、单腺体提取法(Single gland extraction, SGE)、衍生化反应、气相色谱(Gas-chromatography, GC)、气相色谱-质谱联用(Coupled gas-chromatography/mass spectrometry, GC-MS)的方法鉴定出处女雌虫性腺中含有五种性信息素成分:Z5-12:OH, Z5-12:OAc、 Z5, E7-12:OH、Z5, E7-12:OAc和Z5,E7-12:OPr。因不同物质在不同极性柱上的分配系数不同,所以利用HP-5MS和DB-WAX毛细柱检测性信息素在单个性腺中的含量时结果不同,但差异不显著。采用顶空吸附-固相微萃取(HS-SPME)的方法经DB-WAX毛细柱分析发现Z5,E7-12:OH、Z5,E7-12:OAc和Z5,E7-12:OPr三种物质的量分别为0.62±0.42ng(平均值±SD),0.57±0.39ng,0.10±0.04ng,三者的比例为100:91.94:16.13;采用单腺体提取(SGE)后在HP-5MS毛细柱上分析发现Z5,E7-12:OH、Z5,E7-12:OAc和Z5,E7-12:OPr的平均量分别为0.54±0.34ng,0.42±0.7ng和0.23±0.33ng,比例为100:90.13:57.61。这五种性信息素成分的标准化合物均能激起触角电位(Electroarteriogram,EAG)反应,其中Z5、E7-12:OAc、Z5, E7-12:OH的反应值最大,分别为14.59±6.09mv、12.02±5.72mv(平均值±SD、N=25)。在剂量反应中Z5, E7-12:OAc随剂量的增加反应值增大,在10μg时达到饱和;其它物质在0.01-100μg之间均随剂量的增加,反应值增加。用顶空吸附-固相微萃取(HS-SPME)的方法萃取单头处于召唤期的处女雌蛾6h后的气相色谱与触角电位联用(Coupled GC-electroantennographic detection, GC-EAD)中分析发现性腺中存在的以上五种物质均能激起反应;在风洞试验中当滤纸条诱芯中加入Z5, E7-12:OH, Z5,E7-12:OAc, Z5, E7-12:OPr的比例为1000:1000:44.37时能够激起雄虫完全的行为反应,研究发现Z5,E7-12:OPr在雄虫接近诱芯和接触诱芯的行为中起很重要的作用。为开发释放速率稳定、持效期长的仿生诱芯,有必要评价性信息素成分在两种最常用的释放载体(聚乙烯管和复合橡胶)上的释放速率和异构化效果。本研究在风洞条件下采用吸附剂Porapak Q收集9种共轭二烯和单不饱和性信息素成分在不同时间的释放量,用正己烷洗脱后进行气相色谱定量分析。发现9种性信息素成分在聚乙烯管载体上初始释放速率较低,从第16d开始迅速上升,在第29-43d内达到最大释放值,随后释放速率逐步降低到低释放状态。9种性信息素成分在复合橡胶载体上从点样时起释放速率最高,15d后显著下降,第29d后释放速率一直处于较低的释放水平。在聚乙烯管载体上E5,Z7构型的十二碳二烯醛、醇和乙酸酯的释放速率大于相应的Z5,E7构型的释放速率,且醛和醇类性信息素释放速率大于酯类的释放速率。释放高峰期内聚乙烯管载体上性信息素成分(除Z5,E7-12:OH外)的释放速率高于复合橡胶载体上的释放速率,两者差异显著。复合橡胶载体上的性信息素残留量显著大于聚乙烯管载体;两种释放载体对共轭二烯性信息素成分的异构化率也有显著差异。
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