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目的:研究飞秒激光辅助的白内障手术对房水和晶体囊膜的影响。 方法:1)手术步骤:术前,所有患者用复方托吡卡胺(卓比安兴齐中国)散瞳,用盐酸丙美卡因滴眼液(Alcaine,Alcon,USA)行表面麻醉,所有的手术均由经验丰富的同一位医师完成。对照组:在颞侧水平位行-2.75mm透明角膜缘切口后,用1ml注射器从前房中抽取约100ul的前房水。立即将前房水转入无菌塑料管中并将其储藏在-80℃的冰箱中等待分析。前房中注入粘弹剂(博士伦福瑞达山东)后,用撕囊镊进行连续环形撕囊,囊膜直径比晶状体直径少0.25mm。用撕囊镊将囊膜取出并浸在福尔马林溶液中固定。采用超乳机(Stellaris,Bausch& Lomb,USA)将晶体核及皮质移除。人工晶状体(IOL)植入囊袋中,水密切口。实验组:飞秒机(LLS-fs3D,LensAR,USA)撕囊,囊膜直径大小如对照组所述,晶体核被劈成大小相等的六块。飞秒激光的能量范围为5uJ-15uJ,激光的点分离范围为4×8um,在进行透明角膜切口(切口与外界不相通)、撕囊、劈核等操作时,激光能量的缺省值为5uJ。由操作者根据晶状体核的硬度决定使用的激光能量大小。飞秒激光操作完成后进行超声乳化操作,期间间隔约20分钟。除了用飞秒撕囊和劈核外,实验组的其余操作步骤与对照组的均相同,房水和囊膜的收集方法如对照组所述。2)晶状体囊膜形态分析:福尔马林溶液固定的前囊膜用酒精进行梯度脱水,二甲苯透明化,石蜡包埋,然后进行4um厚度的切片处理。HE染色后,对其细胞形态进行评估。然后加热蜡块使其溶解并取出囊膜,用二甲苯和梯度酒精脱蜡,清水冲洗后,用瑞氏-姬姆萨染色液(WG)进行染色,在光学显微镜下评估囊膜边缘形态。光学显微镜观察前囊膜的边缘及其细胞形态。3)房水蛋白分析:采用SDS-PAGE技术提取房水中的蛋白成分,刀片切割蛋白条带,胰蛋白酶消化蛋白条带,质谱仪(UltraflexⅢ TOF/TOF, BrukerDalton,Germany)分析蛋白成分。4)化学分析仪(Aeroset Clinical ChemistryAnalyzer, Abbott,USA)检测房水中的电解质。 结果:1)囊膜边缘形态分析显示:在400×的光学显微镜下,实验组的囊膜边缘呈锯齿状,对照组的囊膜边缘光滑无锯齿。在400×的光学显微镜下,两组的囊膜边缘均可见一条窄的无细胞带。HE染色(400×的光学显微镜)发现实验组和对照组的囊膜边缘细胞形态均完好无损。2)房水蛋白的质谱分析结果显示:两组的房水中均含有血清蛋白,此外,在实验组的房水中还检测到β-晶状体蛋白B1,γ-晶状体蛋白S及转铁蛋白,而在对照组中未检测到。实验组和对照组的K+,Na-,Cl-离子浓度有明显的不同(P=0.02,0.03,0.04)。 结论:飞秒辅助的白内障手术导致晶体中的转铁蛋白和晶状体蛋白向房水中释放,并引起房水中K+,Na+,Cl-离子浓度的变化。飞秒激光未引起对眼组织有毒性作用的物质生成。