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目的:在JNK1/2特异性抑制剂SP600125的干预下,通过观察肺组织W/D值、血清NO和TNF-α、肺组织MPO、ICAM-1、c-Jun及i NOS m RNA等多种炎症因子变化,探索JNK1/2/AP-1信号通路在LPS诱导的小鼠ALI进程中PMNs聚集的机制。方法:C57BL/6小鼠按随机抽样分为3组,Control组经鼻滴入PBS液50μl+腹腔注射PBS液2ml,LPS组经鼻滴入LPS(40mg/ml)50μl+腹腔注射PBS液2ml,LPS+SP600125组经鼻滴入LPS(40mg/ml)50μl+腹腔注射SP600125液2ml。造模后分别于12h、24h、48h和72h观察小鼠一般状况和肺组织病理损伤情况,计算肺组织W/D值、测定血清NO含量及肺组织MPO活性;免疫组织化学测定肺组织ICAM-1及c-Jun表达变化;ELISA法检测血清TNF-α表达水平;RT-PCR测肺组织i NOS m RNA转录水平;Western blot测定JNK1、JNK2及p-JNK1/2蛋白表达。结果:1.小鼠一般状况:Control组小鼠口唇红润,呼吸平稳,解剖后肺组织外观色泽粉红;LPS组小鼠出现毛发竖立,呼吸急促,口唇发绀,抓取时逃避动作缓慢,解剖后肺部体积增大,局部见暗红色出血灶;SP600125干预后小鼠呼吸急促减轻,精神萎靡有所改善,解剖后肺体积及出血范围均较LPS组小,但未恢复正常。2.肺组织病理损伤:HE染色条件下,Control组肺组织结构完整,肺泡间隙清晰,无肺泡壁断裂,无肺泡及间质充血、炎症细胞浸润;LPS组小鼠肺泡壁断裂,肺泡腔内可见炎症细胞、红细胞及富含蛋白质浆液渗出,随着造模时间延长,病理损害加重;SP600125组肺损伤较LPS组减轻。3.小鼠肺组织W/D值:与Control组相比,LPS组肺组织W/D值均升高(P<0.05);经SP600125干预后肺组织W/D值低于LPS组(P<0.05)。4.血清TNF-α表达水平:LPS组小鼠血清TNF-α浓度各时间点均高于Control组(P<0.01);经SP600125干预后血清TNF-α浓度低于LPS组(P<0.05),但仍高于Control组。5.血清NO含量:LPS组血清NO含量较Control组均增加(P<0.01);与LPS相比,经SP600125干预后血清NO含量各时间点降低(P<0.05)。6.肺组织MPO活性:与Control组相比;LPS组肺组织MPO活性增加(P<0.01);经SP600125干预后肺组织MPO活性低于LPS组(P<0.05)。7.免疫组织化学测肺组织ICAM-1及c-Jun表达:以胞质中出现棕黄色(和)或棕褐色颗粒为阳性表达。Control组ICAM-1及c-Jun表达很少;LPS组在各时间点ICAM-1及c-Jun阳性表达细胞均较Control组增加;经SP600125干预后ICAM-1及c-Jun阳性表达细胞不同程度减少。8.RT-PCR测定肺组织i NOS m RNA转录水平:LPS组肺组织i NOS m RNA表达各时间点高于Control组(P<0.01);经SP600125干预后肺组织i NOS m RNA在24h、48h、72h表达水平较LPS组降低(P<0.05),在12h肺组织i NOS m RNA与LPS组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。9.Western Blot测定肺组织JNK1、JNK2、p-JNK1/2表达:各时间点LPS组JNK1、JNK2、p-JNK1/2的蛋白表达均呈不同程度增强,与Control组相比(P<0.05)。经SP600125干预后小鼠肺组织JNK1表达强度在各时间点低于LPS组(P<0.05);在24h和48h,JNK2蛋白表达强度较LPS组降低(P<0.01);在12h及72h,JNK2表达强度与LPS组相比,差异无统计学意义(P>0.05);肺组织pJNK1/2表达强度在各时间点低于LPS组(P<0.05)。结论:1.SP600125通过抑制JNK1/2信号通路,减轻LPS诱导的小鼠ALI进程中的肺水肿、降低炎症因子NO、TNF-α等表达、减少PMNs肺组织聚集,从而减轻小鼠ALI炎症反应。2.在LPS诱导的小鼠ALI早期,胞质内JNK1/2活化生成磷酸化JNK1/2(p-JNK1/2),p-JNK1/2进入细胞核与AP-1结合,调控细胞因子TNF-α、NO、i NOS m RNA、ICAM-1等表达增加,最终促使大量PMNs迁徙至小鼠肺部聚集、活化并释放细胞毒性物质,发挥相应的生物学效应。