交联酶聚集体技术是一种简单有效的固定化酶方法，获得的交联酶聚集体具有活性高，操作稳定性好等优势。然而，如何调控交联酶聚集体的颗粒大小、孔隙率和形貌仍需要进一步研究。本论文分别以CaCO3和胶体晶体为模板制备了多孔球形辣根过氧化物酶交联酶聚集体和三维有序大孔辣根过氧化物酶交联酶，利用淀粉作为致孔剂制备了大孔脂肪酶交联酶聚集体，优化了这三种新型交联酶聚集体的制备条件，并对他们的稳定性和催化特性进行了研究。主要研究内容如下：　　多孔球形辣根过氧化物酶交联酶聚集体（p-HRP-CLEAs）的制备及催化特性研究。通过将HRP与CaCO3共沉淀，交联和模板去除，获得p-HRP-CLEAs。通过优化制备过程，当戊二醛浓度为100mM，交联2h时获得最好酶活回收率。通过研究pH稳定性和热稳定性，p-HRP-CLEAs相对于游离HRP具有更好的碱性稳定性和热稳定。在工业化生产中，这些特性非常具有吸引力。与游离HRP相比，p-HRP-CLEAs具有更大的Km值和更小的Vmax。将p-HRP-CLEAs应用于苯酚和直接黑-38的去除，结果表明p-HRP-CLEAs具有很高的去除效率和相对好的重复使用性。　　三维有序大孔辣根过氧化物酶交联酶（3DOM-HRP）的制备及催化特性研究。通过将酶填充到胶体晶体模板缝隙中，交联和模板去除，最终获得三维有序大孔酶基生物催化剂。布拉格衍射形成的绚丽的荧光说明了材料具有三维有序大孔结构。当戊二醛浓度为1％时，3DOM-HRP的绝对酶活最高为14.4U/g。通过研究其稳定性，发现3DOM-HRP具有良好的热稳定性和碱性稳定性。将其应用于苯酚去除，发现其具有良好的苯酚去除率和重复使用性，重复使用7次后，去除率仍为50%。为了验证这种方法的普遍适用性，脂肪酶和淀粉酶三维有序大孔材料（3DOM-lipase，3DOM-amylase）也通过这种方法进行了制备。通过研究它们的动力学常数，发现制备的三维有序大孔材料与传统 CLEAs相比具有大孔，低扩散阻力和大比表面积的优势尤其当底物为大分子时。　　大孔交联脂肪酶聚集体（p-Lip-CLEAs）的制备及催化特性研究。将酶液与淀粉溶液混合后，饱和硫酸铵沉淀，戊二醛交联，α-淀粉酶去除致孔剂淀粉即获得p-Lip-CLEAs。通过优化制备条件，当戊二醛浓度为25mM，淀粉浓度为0.3%（w/v），交联3h时酶活回收率最高。与传统CLEAs相比p-Lip-CLEAs具有较小的Km和较大的Vmax。将p-Lip-CLEAs应用于油酸乙酯的制备，其具有72%的酯化产率，重复使用5次后，仍具有47%的酯化率。