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目的:急性白血病(AL)的治疗已经取得了很大的进展,包括自体骨髓移植、异基因骨髓移植、外周血干细胞移植以及基因治疗等。但是这些治疗手段也都需要有效的化疗作为基础,而且目前治疗急性白血病的主要方法是化疗。但是由于白血病细胞对药物的原发性耐药,AL患者对化疗的敏感性差别很大。白血病细胞的多药耐药(MDR)是直接影响化疗效果的主要原因。MDR是指由一种药物诱导肿瘤细胞产生耐药后,肿瘤细胞不仅对引起耐药的原药耐药,同时对其他多种结构和作用机制完全不同的药物产生交叉耐药现象。细胞表面分化抗原表达也是AL的预后相关的重要因素。研究表明,CD34+是AL治疗效果差、易复发指标之一。随着流式细胞术的普及应用,白血病细胞表面分化抗原表达的复杂性也被人们进一步认识,但是AL患者白血病细胞异系抗原表达的临床意义还存在争议。本研究通过检测初诊AL患者骨髓中白血病细胞的多药耐药基因表达产物P-糖蛋白(P-gp)与CD34、CD2、CD5、CD7、CD10、CD19、CD20、CD13、CD14、CD33、CD64等细胞表面分化抗原的表达,探讨P-gp的过度表达与CD34、CD2、CD5、CD7、CD10、CD19、CD20、CD13、CD14、CD33、CD64等细胞表面分化抗原表达的关系及临床意义,明确它们在AL中的表达有无相关性及其协同表达的临床意义。
方法:应用流式细胞术对81例初诊急性髓系白血病(AML)和40例初诊急性淋巴细胞白血病(ALL)患者进行P-gp及免疫表型检测。单克隆抗体的组合CD34/P-gp/CD45、CD14/CD13/CD45、CD33/CD7/CD45、CD64/CD2/CD45、CD10/CD5/CD45、CD19/CD20/CD45、cCD79a/CD45、cMPO/cCD3/CD45。阳性判断标准为P-gp≥10%,CD34≥20%,淋系抗原≥30%,髓系抗原≥20%。运用SPSS13.0统计软件,以P≤0.05为差异在统计学上有显著性意义。
结果:
1.81例初诊AML P-gp的阳性表达率为39.5%(32/81),40例初诊ALL P-gp的阳性表达率为45.0%(18/40);CD34在初诊AML和初诊ALL中的阳性表达率分别为51.9%(42/81)和60.0%(24/40);Ly+AML表达率为22.2%(18/81),其中CD7阳性率最高,为12.3%(10/81)。My+ALL表达率为27.5%(11/40),其中CD13阳性率最高为17.5%(7/40)。P-gp、CD34及异系抗原表达阳性率在AML和ALL两组中的比较均无统计学差异(P>0.05)。
2.在AML中P-gp+组与P-gp-组的CR率分别为34.4%(11/32)和77.6%(38/49),CD34+组与CD34-组的CR率分别为47.6%(20/42)和74.4%(29/39),P-gp和CD34均与预后成负相关(P<0.05)。Ly+ AML与Ly-AML CR率(44.4% vs65.1%)无统计学差异;在ALL中,P-gp+组与P-gp-组的CR率(55.6% vs81.8%)、CD34+组与CD34-组的CR率(58.3% vs87.5%)及My+ ALL与My-ALL CR率(54.5% vs72.4%)均无统计学差异(P>0.05)。
3.P-gp阳性患者CD34表达率(AML23/32,ALL15/18)明显高于P-gp阴性患者(AML19/49,ALL9/22),有统计学差异(P<0.01)。P-gp的过度表达与CD2、CD5、CD7、CD10、CD19、CD20、CD13、CD14、CD33、CD64表达均无关(P>0.05)。
4.根据AL患者P-gp与CD34的表达分为4组:A组为P-gp+/CD34+表型,B组为P-gp-/CD34-表型,C组为P-gp-/CD34+表型,D组为P-gp+/CD34-表型。AML患者4种表型的CR率分别为26.1%、82.7%、70.0%、55.6%,组内比较有统计学差异(x2=18.257,P<0.01),组间两两比较结果为B>A与C>A,其他两组间均无统计学差异;ALL患者4种表型的CR率分别为53.3%、92.3%、66.7%、66.7%,组内比较未发现有统计学差异(x2=5.128,P>0.05);所有AL患者4种表型的CR率分别为36.8%、85.7%、68.9%、58.3%,组内比较有统计学差异(x2=21.138,P<0.01),组间两两比较结果为B>A,其他两组间均无统计学差异。
结论:
1.在AML中,P-gp+患者与CD34+患者CR低,预后差,均可以作为判断预后的指标。
2.Ly+AML和My+ALL与单表型AL相比,CR率无统计学差异,其临床意义还有待进一步深入研究。
3.无论是AML还是ALL,P-gp的过度表达均与CD34相关,而与CD2、CD5、CD7、CD10、CD19、CD20、CD13、CD14、CD33、CD64等其它表面分化抗原无关。
4.P-gp+/CD34+是AL中一类特殊亚型,其CR率更低,预后更差,可作为预测化疗反应及预后指标。对于指导个体化治疗,最终克服耐药,提高疗效具有重要意义。