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铁皮石斛(Dendrobium candidum)是兰科(Orchidaceae)石斛属(Dendrobium)多年生附生草本植物。铁皮石斛具有独特的药用价值,以其茎入药。国际药用植物界称其为“药界大熊猫”;,被民间称作“救命仙草”。铁皮石斛自然繁殖率低,本研究以铁皮石斛原球茎为繁殖体,建立铁皮石斛体细胞胚和人工种子培养体系,旨在通过体细胞胚和人工种子快速繁殖技术,解决铁皮石斛资源匮乏的问题。以铁皮石斛原球茎为繁殖体,初步建立适合铁皮石斛人工种子的制备工艺,为铁皮石斛的高效繁育提供一条新技术途径。经过优化组合在无菌条件下以MS+100g/L土豆汁+0.5 mg/L NAA+30 g/L海藻酸钠+30 g/L蔗糖+10 g/t,保水剂+10g/L木薯淀粉+0.1 g/LAC为人工胚乳,在2%CaCl2中作用15-20 min后获得的人工种子呈规则的圆球形、富有弹性,贮藏15 d后水分保持率为88.83%,贮藏60d后萌发率达到92.86%。该配方大大提高了人工种子的萌发率,表明此配方是无菌条件下制备铁皮石斛人工种子的最优组合。在上述最优组合人工胚乳中添加8.8g/L百菌清或4.4g/L多菌灵都可以有效抑制染菌,在开放体系中培养15 d后人工种子染菌率为0,萌发率分别为25%和20%。本结果提示在人工胚乳中添加保水剂、抗菌剂等成分,是提高铁皮石斛人工种子栽培中抗菌性和减少水分丧失的有效手段。