本研究从对增菌方案、DNA模板的制备、引物的选择、PCR反应体系、避免假阴性等方面进行对检测沙门氏菌的PCR技术进行优化，试图建立一种最佳的检测沙门氏菌的PCR技术。实验结果如下： 1.使用BPW(缓冲蛋白胨水)增菌液为培养沙门氏菌的增菌液，37℃增菌，不振荡培养8h可以达到108cfu/mL以上，可以满足大多PCR检测技术灵敏度(102～106cfu/mL)的要求，过多的延长增菌时间是没有必要的；在增菌培养的前8h，使用选择性培养基和振荡培养并不能提高增菌效果。这样就建立了快速简便的样品增菌方案。 2.从快捷、简便和经济角度考虑，热裂解法是最佳的模板DNA制备技术。 3.引物的选择上，以InvA基因的S139、S141引物进行扩增，其敏感性和特异性分别达到99.4％和100％，相对于其他常用的引物检测效果较好。 4.经多次实验摸索，反应条件是模板在97℃变性7min，以保证PCR的顺利进行；复性和延伸温度为60℃lmin；用29个循环；建议用1.0U酶扩增即可出现亮带，另外，注意不同来源和批次Taq酶效果不完全相同；dNTPs的终浓度定为100μmol-L-1；引物的终浓度为0.32μmol-L-15.在PCR反应体系放置指示假阴性的扩增内标(internal amplification control，IAC)是必要的。本研究通过添加一条人工构建的LAC片段来防止假阴性的出现，从而提高PCR检测的准确率。