苏云金芽胞杆菌制剂检测方法的研究

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该文主要研究苏云金芽胞杆菌制剂检测中标准蛋白的选择和制备、苏云金芽胞杆菌毒素蛋白含量和效价之间的关系、苏云金芽胞杆菌制剂中化学杀虫剂的检测方法.以YBT1520和BUB8菌株用PM培养基进行清液发酵,经双相法提取伴胞晶体,得到以CryⅠ和CryⅡ为主的两种纯度较高的伴胞晶体.SDS-PSGE分析、元素分析和含水量测定的结果表明,两种伴胞晶体在电泳中分别只有一条主要条带,没有其他杂蛋白.元素分析的结果说明双相法制得的伴胞晶体成份比较稳定,其组间相对变异系数(RSD)在1.88~3.58﹪之间,组内RSD值在0.087~2.63﹪间.根据含水量测定和网上统计资料得出CryⅠ和CryⅡ伴胞晶体的毒素蛋白含量分别为63.64﹪和45.60﹪.以棉铃虫和甜菜夜蛾为供试昆虫,对CryⅠ和CryⅡ伴胞晶体进行复配试检测它们之间在杀虫过程中的相互作用.比较CryⅠ和CryⅡ伴胞晶体和牛血清白蛋白(BSA)及化工部的标准原粉对考马斯亮蓝R-250的吸阶特性,可知4种蛋白的吸附率从大到小的顺序为BSA> CryⅠ》CryⅡ标准原粉.通过比较CryⅠ和CryⅡ伴胞晶体和标准原粉对相同样品的精密度和回收率,表明标准原粉测定的结果偏高,其回收率存在较大的差异.根据以上的试验结论建立了苏云金芽胞杆菌制剂的标准检测程序.
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