论文部分内容阅读
目的： 研究PERK磷酸化在同型半胱氨酸致心肌损伤中的作用，阐明同型半胱氨酸致心肌损伤的可能机制。 方法： 以H9C2细胞为离体研究对象，用不同浓度4-PBA干预细胞（4-PBA浓度分别为：0mmol/L、1mmol/L、2mmol/L、3mmol/L、4mmol/L、5mmol/L），探讨4-PBA对细胞毒性作用，选择最适浓度用于后续实验。同时以不同浓度HCY干预H9C2心肌细胞（HCY浓度分别为：50umol/L 、100 umol/L、400 umol/L、1000 umol/L），检测细胞活力，探讨HCY对细胞毒性。而后根据4-PBA及HCY对细胞的半数抑制率选择最适干预浓度完成后续实验。TUNEL凋亡染色检测各组细胞凋亡分数，免疫荧光法检测ERO1α表达差异，Western Blot法检测内质网应激相关因子表达。 结果： ①2mmol/L的4-PBA对H9C2心肌细胞无毒性作用，和对照组比较差异无统计学意义（t=0.245,p=0.823）；② HCY对H9C2心肌细胞具有损伤作用，其对细胞的损伤作用随浓度增加而增大（F=2039.58,p＜0.001）；③经400ummol/L HCY干预的心肌细胞凋亡明显增加（t=21.593,p＜0.001 ），经4-PBA阻断内质网应激后凋亡分数下降（t=8.742，p＜0.001）；④经HCY干预后的心肌细胞内质网应激相关因子PERK、p-PERK、CHOP、ERO1α表达增加，经4-PBA阻断内质网应激后，以上因子表达下降，差异有统计学意义（p<0.05）。 结论： HCY对H9C2心肌细胞具有损伤作用，且呈浓度依赖性；HCY对心肌细胞损伤作用是通过促进PERK磷酸化激活CHOP-ERO1α通路所介导的凋亡实现的。