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柑橘溃疡病(citrus canker)是影响世界柑橘生产的重要的检疫性病害,对柑橘产业造成了重大的影响。其致病菌为地毯草黄单胞杆菌柑橘致病变种(Xanthomonas axonopodis pv.citri,Xac)。外膜蛋白(outer membrane protein)是细菌外膜的重要组成成分,在其生命活动中具有重要作用,表现在营养摄取、物质代谢运输、维持细菌正常形态、物质的合成以及细菌的致病力等方面。通过对基因组和蛋白质组的分析,发现外膜蛋白是Xac的重要组成成分。而有关Xac外膜蛋白的研究较少,推测外膜蛋白对Xac的新陈代谢,致病力以及物质合成等方面具有重要作用。因此选择XacOmp9、XacOmp11、XacOmp17三个外膜蛋白进行生物信息学分析,并对这三个基因进行克隆和表达,制备了相应的多克隆抗体,经过免疫印迹分析(Western blot),间接免疫荧光定位(IFA定位),免疫共沉淀和LTQ质谱分析。主要研究结果如下：1.XacOmp9基因为360bp,编码的蛋白131aa,14.9kDa,pI9.81,无信号肽,具有一个Om1A功能模块。IFA定位发现,XacOmp9蛋白位于Xac菌体表面。免疫共沉淀和LTQ分析显示,共沉淀的蛋白包括生物素／硫辛酰基结合域,二组分系统的调节蛋白、Hsp70、肽基脯氨酸顺反异构酶,推测XacOmp9通过与二组分系统的调节蛋白协调作用以调节菌体对SDS、抗生素等的敏感性。2. XacOmp11基因为462bp,编码的蛋白181aa,19.5kDa,pI7.61,具有1个信号肽1个OmpA功能模块。IFA定位发现,XacOmp11蛋白位于Xac菌体表面。免疫共沉淀和LTQ分析发现,共沉淀的蛋白包括主要与羧肽酶、氨酰-tRNA合成酶类、γ谷酰胺磷酸还原酶ATP转磷酸核糖激酶、γ谷酰胺磷酸还原酶等酶类相关,而这些酶类主要参与Xac自身蛋白合成和宿主蛋白水解,XacOmp11主要利用这些氧化还原酶、蛋白质水解合成酶这些酶类参与和宿主间的相互作用。此外,OmpA前体移位需要SecA蛋白来完成,且需要相应的能量代谢。XacOmp11可能通过趋化性反应调节器来完成其抗药性作用。除此之外,XacOmp11的共沉淀中,发现了和XacOmp9中共有的蛋白延长因子G,这说明它们二者都和蛋白合成相关,XacOmp9和XacOmp11之间是否具有某种关系需要进一步研究。3. XacOmp17基因1464bp,编码的蛋白488aa,51.8kDa,pI5.5,具有1个信号肽和2个OEP功能模块。IFA定位分析发现,XacOmp17位于细菌菌体表面。免疫共沉淀和LTQ分析发现,生物素/硫辛酰基、乙酰辅酶A硫解酶、TonB依赖型受体可能与XacOmp17有关联,进一步支持了OEP在形成三聚孔道和基质运输方面的作用。与XacOmp17相关的假定蛋白XAC0019,其与甲苯和芳香族化合物的降解相关,推测XacOmp17为甲苯和芳香族化合物的降解提供通道使其进入细胞,进一步发挥假定蛋白XAC0019降解甲苯等的作用。但XacOmp17的功能模块是否具有多药抗性还需进一步研究。