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目的:口服给药是迄今为止应用最广泛的一种给药方式,但药物经由胃肠道这一复杂的环境时会受到肠上皮细胞与肠道代谢酶的影响。研究证实肠上皮细胞膜上的P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)对口服药物的跨膜转运和药物的生物利用度可产生重大影响。P-gp可能量依赖性地将吸收的药物重新泵回肠腔中去,是限制P-gp底物药物吸收的主要因素,也是药物口服吸收的重要屏障。我们前期研究已证实Pluronic嵌段共聚物具有一定程度的P-gp抑制作用,同时发现SWCNTs可能也具有P-gp抑制作用,鉴于此,我们设想如将具有P-gp抑制作用的SWCNTs与Pluronic联合使用,利用这种新型的纳米复合材料构建新型自组装口服载药系统,在解决SWCNTs水分散性问题的同时,又可以利用两者双重的P-gp抑制作用,有效提高P-gp底物药物的口服生物利用度,这为SWCNTs口服释药系统的研究提供了新思路。方法:(1)Pluronic/SWCNTs纳米复合物的制备以外观形态、紫外可见最大吸收、粒径作为评价指标,考察了分散方法、Pluronic分散剂种类、SWCNTs投料量、超声分散功率与次数等因素对SWCNTs分散效果的影响,确定了SWCNTs最优分散条件。(2)Pluronic/SWCNTs对Caco-2细胞的毒性研究采用MTT法和LDH活力测定法分别考察Pluronic/SWCNTs对Caco-2细胞的毒性。(3)Caco-2细胞模型研究Pluronic/SWCNTs对小肠P-gp药泵抑制作用选用Caco-2细胞模型,以P-gp底物罗丹明123(R-123)作为荧光探针药物,以P-gp抑制剂盐酸维拉帕米为阳性对照,考察Pluronic/SWCNTs对R-123细胞摄取的影响,采用HPLC对R-123进行定量分析,SPSS软件对结果进行统计分析,研究Pluronic/SWCNTs对P-gp药泵的抑制作用。(4)采用大鼠在体单向肠灌流法进一步验证Pluronic/SWCNTs对小肠的P-gp药泵抑制作用。结果:(1)采用探头超声分散法,以10mg/mlF127和F68为辅料,260W探头超声功率,超声40次(单次超声时间为3s),成功分散SWCNTs。(2)MTT实验和LDH活力测定实验结果表明,在实验浓度范围内Pluronic/SWCNTs对Caco-2细胞的生长基本没有影响,毒性很小。(3)Caco-2细胞摄取实验结果表明,实验浓度范围内高浓度Pluronic/SWCNTs促细胞摄取作用较低浓度弱;对于F127/SWCNTs,浓度为5~10μg/mL时SWCNTs在促细胞摄取作用中起主导作用,浓度高于50μg/mL时F127在促细胞摄取作用中起主导作用;对于F68/SWCNTs,SWCNTs在促细胞摄取作用中起主导作用,F68促细胞摄取作用较弱。(4)在体单向肠灌流实验结果表明,Pluronic/SWCNTs较Pluronic单独存在时促小肠吸收作用显著提高;Pluronic/SWCNTs的促小肠吸收作用具有浓度依赖性,50μg/mL Pluronic/SWCNTs促小肠吸收作用最显著。结论:通过上述实验结果表明,不同组成的Pluronic/SWCNTs可以在一定程度上促进P-gp底物R-123的跨膜吸收,具有不同程度的P-gp抑制作用,其制备方法科学、简单、重复性及稳定性好,生物相容性好,为Pluronic/SWCNTs提高P-gp底物药物的口服生物利用度研究提供了一定的实验依据。