【摘 要】
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本课题运用了“数据库消减杂交”(DigitalDifferentialDisplay,DDD)策略;结合实验手段成功地克隆到一个在小鼠睾丸中高表达的生精细胞凋亡特异的新基因MSRG-11,并对该基因的
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本课题运用了“数据库消减杂交”(DigitalDifferentialDisplay,DDD)策略;结合实验手段成功地克隆到一个在小鼠睾丸中高表达的生精细胞凋亡特异的新基因MSRG-11,并对该基因的功能进行了初步研究;并根据MSRG-11基因序列,并利用同源基因搜寻法的原理,克隆了MSRG-11人类同源基因SPATA17。利用电子差异展示方法获得睾丸组织高表达基因谱
作者在NIH生物信息中心UniGene中选择来自睾丸(包括睾丸癌)的EST文库与来自其它组织(包括该组织来源癌组织)的EST文库利用DDD软件定量分析代表各基因的EST在各组文库中出现的频次,并经过统计学分析,获得两组文库间有统计学意义的差异。
总结了本研究运用数据库消减杂交方法这一新策略结合实验手段成功克隆了一个小鼠睾丸生精细胞相关的新基因MSRG-11,并采用Northernblot、RT-PCR、Westernblot、免疫组化及流式细胞仪技术等多种方法联合对MSRG-11基因的表达特征及可能的功能进行了综合研究,各方法之间相互印证,结果可靠。我们认为,MSRG-11基因是一个睾丸凋亡的特异新基因,它可能在精子的发生以及睾丸生殖细胞凋亡中具有重要作用。另外我们克隆了MSRG-11人类同源基因SPATA17并对序列分析进行了研究。
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