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双特异性磷酸酶是酪氨酸磷酸酶中最近发现的一个新的亚类，这个家族中的成员既能对磷酸化酪氨酸去磷酸化，也能对磷酸化丝/苏氨酸去磷酸化。目前已知，大部分双特异性磷酸酶都在有丝分裂原激活蛋白磷酸酶信号途径(MAPK)中行使重要生理功能。在这篇论文中，我们从人类胎脑cDNA文库中克隆了两个新的人类双特性磷酸酶DUSP18(人类双特异性磷酸酶18)和DUSP23(人类双特异性磷酸酶23)。DUSP18 cDNA全长2450个碱基对，编码一个188个氨基酸的蛋白质。DUSP23全长726个碱基对，编码150个氨基酸。这两个蛋白质都具有一个双特异性磷酸酶催化结构域，与其他很多双特异性磷酸酶不同的是没有CDC25同源结构域。 DUSP18在几乎所有细胞系和组织中表达，而DUSP23只在胎儿组织和睾丸、结肠两个成人组织中表达。另外，DUSPl8能在受胞外刺激时大幅提高自身表达量而DUSP23的表达量与刺激无关。细胞定位实验显示：DUSP18在细胞核和细胞质中都有而DUSP23只在细胞质中表达，两者的定位都不随胞外刺激改变。 在以pNPP为底物的体外磷酸酶检测中，DUSP18和DUSP23都表现出了磷酸酶活性，而且它们还能在体外对磷酸化酪氨酸和磷酸化丝/苏氨酸去磷酸化，提示它们可能是新发现的双特异性磷酸酶。 接着我们采用磷酸化检测，体外结合实验和免疫共沉淀等方法研究它们的体内底物。结果发现DUSP23只能在体外对p44ERK1去磷酸化，而在体内不能，提示DUSP23可能不是MAPK磷酸酶。相反的，DUSP18在体内体外都能特异性的结合SAPK／JNK并使之去磷酸化。但对p38或p44ERK1都没有作用。进一步的信号通路检测实验显示，DUSP18在体内还能抑制SAPK／JNKT游信号途径。这些结果提示DUSP18可能在体内是SAPK／JNK活性的重要调控因子。 我们还对DUSP18进行了酵母双杂交实验，结果显示，DUSP18还可能与其它一些蛋白质相互作用，这些蛋白包括CyclinA、SGT1、PRA(S100A6)、SKB1、Sam68和TRK-fused gene。我们通过体外结合实验初步验证了DUSP18与PRA(S100A6)以及DUSP18与CyclinA的相互作用。 综合而言，我们克隆了两条新的人类双特异性磷酸酶DUSP18和DUSP23并对它们的功能进行了研究。结果显示DUSP18可能是体内SAPK／JNK重要调节因子，而DUSP23虽然在体外能对p44ERK1去磷酸化，但其体内功能还不明确。