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当归和川芎组方是重要的活血化瘀类对药之一,其主要活性部位有挥发油、酸酚性部位和生物碱,对缓急缺血性脑血管病有较好的疗效。本方现有的剂型有散剂和滴丸,本文在对本方有效部位提取纯化的基础上,开展了注射剂处方的设计、稳定性研究、药效试验和指纹图谱制备工作。 首先,建立了阿魏酸或藁本内酯的测定方法,用于提取纯化中两指标定量分析。建立TLC薄层鉴别法对注射液中阿魏酸或藁本内酯进行定性鉴别,并用高效液相梯度洗脱法同时测定注射液中两指标的含量。 采用双提取工艺提取当归川芎中有效部分,并用D101大孔树脂富集、聚酰胺吸附、和乙醚萃取对其分离纯化,制备了指标成分含量大于25%、质量检查合格的中间体。 考察了温度、光线、热、pH值、HPβCD、有机共溶剂、稳定剂等因素对藁本内酯稳定性的影响,提出了能使有效部位群稳定的注射液处方。在含当归川芎生药0.5g/ml、0.8%吐温-80、20%丙二醇和0.3%稳定剂S_I的处方中,以阿魏酸和藁本内酯为代表的有效部分较稳定,加速试验3月后阿魏酸含量大于94.7%,藁本内酯含量98%以上,冰箱长期留样试验3月后两指标含量均在98%以上。 对注射液溶血性、急性毒性和肌肉刺激性进行了检查,并用小鼠断头试验、亚硝酸钠中毒致脑缺氧试验、扭体和热板法试验对注射液在改善脑缺血和镇痛方面的药效作了初步评价。结果表明注射液较安全,可供临床肌内注射。小鼠腹腔给药2.5g生药/kg以上能显著延长小鼠断头后喘息时间,改善亚硝酸钠所致脑缺氧;剂量0.5g/kg生药以上,对醋酸所致的小鼠扭体有明显的抑制作用,并可明显提高小鼠痛阈值。提示复方当归川芎注射液对脑缺血有改善作用,且有较强的镇痛作用。 建立了当归、川芎药材及注射液的指纹图谱,结果表明,药材和制剂中指纹图谱方法学考察符合要求,10批药材或制剂间相对保留时间、非共有峰峰面积、共有指纹峰峰面积比值等各项指标均在规定范围以内,各批药材间或制剂间指纹图谱相关性良好。