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试验研究了不同硒源和水平对肉用种母鸡及其后代的生物学效应,并比较了不同母源硒对发育鸡胚各阶段死亡率、抗氧化能力的影响及其对氧化应激鸡胚的保护作用,以揭示不同硒源差异性调控鸡胚死亡率的分子机理,旨在阐明新型有机硒源-SM (selenomethionine,硒代蛋氨酸)的主要功能及其作用机制。试验一不同硒源和水平对肉用种母鸡及其后代的生物学效应本试验采用3×2完全随机设计,即3种硒源(SS (sodium selenite,亚硒酸钠)、SY (selenium-enriched yeast,酵母硒)、SM)和2个硒水平(0.15和0.30mgSe/kg)。试验选用48周龄健康岭南黄父母代肉用种母鸡540只,随机分为6组,每组含3个重复,每重复30只。预试期2周,正试期8周。种鸡基础日粮硒含量为0.04mg Se/kg.收集试验最后7天种蛋于18℃环境存放,常规孵化管理。孵化结束后,母源各重复随机选取初生雏鸡60只(共1080只)进行饲养试验,饲喂相同的商品日粮(添加亚硒酸钠0.15mg Se/kg,实测硒水平0.19mg/kg).于种鸡饲养试验结束、种蛋孵化结束、肉鸡饲养试验结束分别屠宰取样分析。获得主要结果如下：(1)种鸡饲养试验结果表明：同比0.30mg/kg水平,0.15mg/kg水平显著(P<0.05)提高了种蛋孵化率,并有提高出雏率的趋势(P<0.1)。不同硒源对种母鸡繁殖性能无显著影响(P>0.05),但0.15mg/kg水平SM组获得了最佳的产蛋率、受精率、受精蛋孵化率和出雏率。(2)硒含量分析结果显示：SM和(或)SY较SS提高了种母鸡、发育鸡胚、初生雏鸡的血清或组织及种蛋的硒含量(P<0.05)；同比SY,SM提高了种母鸡血清、种蛋、雏鸡肾脏和肌肉的硒含量(P<0.05).0.30mg/kg水平硒沉积量高于0.15mg/kg水平(P<0.05)。(3)抗氧化水平测定结果表明：同比SS,SM和(或)SY显著(P<0.05)提高了种鸡肝、肾CAT活力、T-AOC及雏鸡肾脏CAT活力,降低了种鸡肾脏、胰脏和雏鸡肝脏MDA含量。同比0.30mg/kg水平,0.15mg/kg水平显著(P<0.05)提高了种鸡血清GPx、肾脏T-SOD活力及血清、肝脏和肌肉T-AOC (P<0.05),降低了种鸡血清、肾脏、肌肉和胰脏MDA含量(P<0.05),提高了雏鸡肝脏GPx、T-SOD活力和T-AOC及肾脏T-SOD、CAT活力和T-AOC (P<0.05),降低了雏鸡肾脏MDA含量(P<0.05)。(4)后代肉鸡生产性能结果显示：同比SS, SM降低了21日龄后代肉鸡料重比(P<0.05)；不同硒源和水平对56日龄后代肉鸡生产性能无显著影响(P>0.05),仅SM有降低56日龄后代肉鸡料重比的趋势(P<0.1)。(5)后代肉鸡胴体组成和肉质测定结果表明：不同硒源和水平对后代肉鸡各胴体组成均无显著影响(P>0.05)；SM较SS和SY显著(P<0.05)提高了后代肉鸡胸肌16小时pH值。0.15mg/kg水平较0.30mg/kg水平提高了后代肉鸡胸肌8小时肉色Hunter a值及胸肌pH值(P<0.05),降低了后代肉鸡胸肌滴水损失率(P<0.05)。(6)种母鸡和雏鸡硒蛋白基因表达分析结果显示：同比SS,SM和(或)SY提高了种鸡肝脏GPxl mRNA水平TrxRl mRNA水平和活力、SelP mRNA和蛋白水平(P<0.05)；提高了雏鸡GPxl、TrxR1和SelP在肝脏的：mRNA表达和活力或蛋白水平,以及在肾脏的活力或蛋白水平(P<0.05).0.30mg/kg水平较0.15mg/kg提高了雏鸡肝脏TrxR1活力和雏鸡肝、肾SelP的蛋白表达量(P<0.05)。上述结果提示：3种硒源互比,SM在改善种母鸡繁殖性能、硒沉积、抗氧化水平以及后代前期生产性能等指标上表现出更有效的作用,适宜添加水平为0.15mg Se/kg。试验二不同母源硒对发育鸡胚死亡率和抗氧化能力的影响本试验研究了不同母源硒对鸡胚各阶段死亡率以及抗氧化水平的影响。40周龄健康岭南黄父母代肉用母种鸡270只被随机分为3个处理,每处理5个重复。试验组分别饲喂在基础日粮中添加了0.15mg Se/kg SS或SM的日粮,以基础日粮(硒水平0.04mg/kg)作为对照(BD)。种鸡试验预试期2周,正试期8周。收集试验最后7天的种蛋存放于18℃环境中,随后常规孵化管理。取不同胚龄(9、14、19和21日)鸡胚,解剖取样分析。结果表明：(1)同比BD, SM和SS降低了孵化前、中、后及全期鸡胚死亡率(P<0.05)；同比SS, SM降低了孵化后期鸡胚死亡率(P<0.05)。(2)同比BD, SM和(或)SS提高了发育鸡胚GPx、T-SOD和CAT活力及T-AOC (P<0.05),降低了发育鸡胚MDA和ROS含量(P<0.05)。(3)同比SS, SM提高了发育鸡胚T-AOC.19和(或)21胚龄鸡胚T-SOD及CAT活力(P<0.05),降低了19、21胚龄鸡胚MDA和ROS含量(P<0.05)。(4)同比BD, SM和(或)SS提高了14、19、21胚龄鸡胚GPxl mRNA水平和活力及TrxRl活力(P<0.05)；上调了19、21胚龄鸡胚TrxRl mRNA表达水平(P<0.05)；提高了发育鸡胚SelP mRNA和蛋白表达量(P<0.05)。(5)同壁SS,SM提高了19和(或)21胚龄鸡胚GPxl、TrxRl、SelP mRNA水平和活力或蛋白水平(P<0.05)。上述结果提示：母源硒对于鸡胚正常生长发育、维持鸡胚抗氧化功能是必不可少的。在孵化后期,SM的作用效果显著优于SS。试验三鸡胚氧化应激模型的构建试验选取岭南黄父母代肉种鸡种蛋1000枚,随机分为5组,每组5个重复。于孵化第17天给予6小时的37.5(对照组)、38.5、39.5、40.5和41.5℃刺激,其余时间均常规孵化管理。结果表明：当刺激温度达到39.5℃时,鸡胚ROS和HSP70含量及抗氧化等特征性指标均产生了显著性变化(P<0.05),且种蛋孵化率无显著影响,由此表明试验已成功建立了鸡胚氧化应激模型。试验四母源硒对氧化应激鸡胚保护作用的研究种鸡试验分组与饲养同试验二。收集试验最后7天的种蛋存放于18℃的环境中,随后常规孵化管理。于孵化第17天时,各重复选取种蛋20枚置于另一孵化箱中,给予6小时的39.5℃高温刺激。刺激结束,在未受刺激和高温刺激鸡胚中,各重复选取5只,解剖取样分析。结果表明：(1)同比BD, SM和(或)SS降低了鸡胚ROS、MDA、羰基和8-OHdG含量以及细胞凋亡指数(.P<0.05),提高了鸡胚GPx、T-SOD和CAT活力(P<0.05)。(2)在氧化应激条件下,同比SS, SM显著降低了鸡胚ROS、MDA、羰基和8-OHdG含量及细胞凋亡指数(P<0.05)。(3)同比BD, SM和(或)SS提高了鸡胚GPxl mRNA水平和活力、TrxRl活力、SelP mRNA和蛋白水平、应激鸡胚TrxR1和SPS1mRNA水平(P<0.05)。(4)在氧化应激条件下,同比SS,SM提高了鸡胚GPx1、TrxR1和SelP mRNA水平及活力或蛋白水平(P<0.05)；上调了SPS1mRNA表达量(P<0.05)。上述结果提示：母源硒提高鸡胚存活率的机制是：通过调控抗氧化硒蛋白的基因表达而增强抗氧化功能,降低鸡胚ROS水平,减缓氧化损伤及细胞凋亡进而降低鸡胚死亡率；在氧化应激条件下,SM的作用效果显著优于SS。