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目的：观察小干扰RNA（small interfering RNA, siRNA）抑制氯离子通道蛋白3（voltage-dependent Cl channels-3, ClC-3）基因表达对大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞（ratpheochromocytoma cells, PC-12）细胞凋亡的影响，探讨ClC-3在过氧化氢（H2O2）诱导的PC-12凋亡中的作用机制。方法：（1）PC-12细胞的传代培养。（2）细胞计数(Cell counting kit-8，CCK-8)试剂盒检测不同浓度H2O2干预12h后，PC-12细胞生存率，确定构建细胞凋亡模型所需H2O2的浓度。（3）采用处于对数生长期的PC-12细胞，随机分4组：正常对照组、模型组、空质粒组、RNA干扰组，每组设6个复孔。其中正常对照组加高糖DMEM完全培养基；模型组加入H2O2干预；空质粒组为转染空质粒后加H2O2干预；RNA干扰组为转染干扰质粒后加H2O2干预。作用12小时后，CCK-8检测细胞生存率；Hochest33342染色细胞形态学观察；Western Blot法检测Caspase-3以及ClC-3蛋白的表达；实时荧光定量PCR检测Caspase-3及ClC-3mRNA的表达；流式细胞仪(Flowcytomet，FCM)进行细胞凋亡率的检测。结果：（1）与0nmol/L模型组比较，50、100、200、300、400、500、600、700nmol/L模型组PC-12生存率降低（P<0.05），且与H2O2浓度呈负相关（r=－0.961, P<0.05）。其中400nmol/L模型组细胞生存率为（49±1.20）%，采用此浓度建立PC-12细胞凋亡的模型。（2）Hochest33342对细胞核染色显示，与正常对照组比较，模型组、空质粒组、RNA干扰组细胞生存率降低，凋亡率增高（P<0.05）。与模型组比较，空质粒组细胞生存率、凋亡率无显著变化（P>0.05），RNA干扰组细胞生存率增高，凋亡率降低（P<0.05）。与空质粒组比较，RNA干扰组细胞生存率增高，凋亡率降低（P<0.05）。（3）Western blot结果显示，与正常对照组比较，模型组和空质粒组细胞Caspase-3和ClC-3蛋白表达增高；RNA干扰组细胞Caspase-3和ClC-3蛋白表达降低（P<0.05）。与模型组比较，空质粒组细胞Caspase-3和ClC-3蛋白表达无显著差异（P>0.05）；与空质粒组比较，RNA干扰组细胞Caspase-3和ClC-3蛋白表达降低（P<0.05）。（4）real-time PCR实验结果显示，与正常对照组比较，模型和空质粒组细胞Caspase-3和ClC-3mRNA表达增高；RNA干扰组细胞Caspase-3和ClC-3mRNA表达降低（P<0.05）。与模型组比较，空质粒组细胞Caspase-3和ClC-3mRNA的表达无显著差异（P>0.05）；与空质粒组比较，RNA干扰组细胞Caspase-3和ClC-3mRNA的表达降低（P<0.05）。(5)流式细胞技术显示；与正常对照组比较，模型组和空质粒组细胞凋亡率显著增高（P<0.05）。与模型组比较，空质粒组细胞凋亡率无显著差异（P>0.05）。与空质粒组比较，RNA干扰组细胞凋亡率显著降低（P<0.05）。结论：（1）H2O2可通过提高Caspase-3表达，激活凋亡信号通路，诱导PC-12发生凋亡。（2）沉默ClC-3基因，减少ClC-3表达，抑制caspase-3介导的凋亡通路，会减少H2O2诱导的PC-12凋亡发生，说明ClC-3氯通道参与了细胞凋亡过程。