论文部分内容阅读
目的:1.以膝骨性关节炎(Knee Osteoarthritis,KOA)模型大鼠为研究对象,探测模型大鼠的穴位敏化现象;2.研究电针敏化穴位对KOA模型大鼠的效应及对关节局部炎症因子的调节作用。方法:1.实验一:SD大鼠56只,按1:3的比例随机分为空白组和模型组,其中空白组14只,模型组42只。模型组采用MIA关节腔注射造模,空白组注射等量NS。用Von Frey电子测痛仪和红外热成像仪检测造模前后大鼠的梁丘、血海、鹤顶、内膝眼、犊鼻、阴陵泉、阳陵泉、后三里、三阴交、悬钟、太冲和双侧肾俞共13个穴位的机械痛阈值和穴区温度,计算造模前后穴位机械痛阈和穴区温度的变化率,并对变化率进行排序,以变化率的大小确定高敏、低敏穴位,对每只大鼠出现高敏、低敏的穴位进行统计,计算出各个穴位出现高敏或低敏的概率,并分析大鼠高敏、低敏穴位的分布规律。2.实验二:SD大鼠36只,其中空白组9只,模型组27只。根据模型大鼠穴位机械痛阈的变化率,鹤顶穴有较高的概率发生高敏化现象(27.3%,9只),也有较高的概率发生低敏化现象(27.3%,9只)。选择鹤顶穴为观察穴位,将鹤顶穴发生高敏化的9只大鼠作为高敏组,鹤顶穴发生低敏化的9只大鼠作为低敏组,其余9只作为模型对照组。电针鹤顶穴及配穴(鹤顶穴直上5mm的非经非穴点),2个疗程后,评价各组大鼠的行为学、关节直径、足底痛阈情况;HE染色、光镜下观察软骨组织病理学Mankin’s评分;WB检测软骨组织ChemR23蛋白表达,ELISA检测关节腔冲洗液中chemerin、IL-6和TNF-α的浓度,分析电针高敏、低敏穴位对上述指标的影响。结果:1.大鼠穴位出现痛觉高敏化概率最高的3个腧穴为:阴陵泉(36.4%)、三阴交(33.3%)、足三里(33.3%);出现痛觉低敏化概率最高的3个腧穴为:右肾俞(51.5%)、太冲(39.4%)、左肾俞(33.3%)。2.大鼠穴位出现温度高敏化概率最高的3个腧穴为:太冲(48.5%)、悬钟(36.4%)、左肾俞(36.4%);出现温度低敏化概率最高的3个穴位为:右肾俞(42.4%)、阴陵泉(39.4%)、悬钟(33.33%)。3.Lequesne MG评分:干预后低敏组和高敏组评分较模型对照组明显降低(P<0.05),高敏组与低敏组相比评分有降低趋势,但差异无统计意义(P>0.05)。提示电针能改善模型大鼠行为学Lequesne MG评分,且电针高敏穴位的作用可能更加明显。4.关节直径:干预后高敏组关节直径明显小于模型对照组和低敏组(P<0.05);低敏组较模型对照组关节直径有降低趋势,但差异没有统计学意义(P>0.05)。提示电针能改善大鼠关节直径,且电针高敏穴位更加明显。5.足底痛阈值:干预后低敏组、高敏组与模型对照组相比,痛阈值明显增加(P<0.05),高敏组与低敏组相比无明显差异(P>0.05)。提示电针能提高大鼠足底痛阈值,但电针高敏、低敏穴位对大鼠足底痛阈的改善无差异。6.软骨Mankin’s评分:低敏组、高敏组Mankin’s评分与模型对照组相比均显著降低(P<0.05),高敏组与低敏组相比降低更加明显(P<0.05)。提示电针能改善模型大鼠Mankin’s评分结果,且电针高敏穴位的改善作用更加明显。7.关节液chemerin浓度:与模型对照组相比:高敏组大鼠chemerin浓度明显降低(P<0.05),低敏组浓度有降低趋势,但差异无统计学意义(P>0.05);高敏组与低敏组相比有降低趋势(P>0.05)。提示电针能下调模型大鼠关节液chemerin浓度,且电针高敏穴位的下调作用可能更加明显。8.软骨ChemR23蛋白表达:低敏组、高敏组大鼠与模型对照组相比,软骨ChemR23蛋白表达量均有下降趋势,但差异无统计学意义(P>0.05);高敏组与低敏组相比有降低趋势,差异无统计学意义(P>0.05)。提示电针可能有下调模型大鼠软骨组织ChemR23蛋白表达的趋势,且电针高敏穴位的下调趋势可能更加明显。9.关节液IL-6浓度:与模型对照组相比:高敏组大鼠IL-6浓度明显降低(P<0.05),低敏组浓度有降低趋势(P>0.05);高敏组与低敏组相比明显降低(P<0.05)。提示电针能下调模型大鼠关节液IL-6浓度,且电针高敏穴位的下调作用更加明显。10.关节液TNF-α浓度:低敏组、高敏组大鼠与模型对照组相比,及高敏组与低敏组相比,TNF-α浓度均无统计学差异(P>0.05),提示电针对大鼠关节液中TNF-α浓度无明显调控作用。结论:1.KOA模型大鼠存在穴位敏化现象:痛觉高敏化穴位以关节局部腧穴为主,痛觉低敏化穴位以远端腧穴为主;温度高敏化和低敏化穴位均以远端腧穴为主。2.电针能改善模型大鼠关节直径和软骨病理表现,且电针高敏化穴位的改善作用更加明显;3.电针能改善模型大鼠的行为学表现和足底痛阈值;4.电针能下调大鼠关节局部chemerin、IL-6等分子的水平,且电针高敏化穴位的下调作用更加明显。