【摘 要】
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该文旨在选择针对肿瘤相关基因DRIM和冠状病毒S蛋白基因这两个靶序列有效的反义寡核苷酸和siRNA,对其进行必要修饰,以提高实用价值,并从分子和细胞水平研究对靶基因表达的调
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该文旨在选择针对肿瘤相关基因DRIM和冠状病毒S蛋白基因这两个靶序列有效的反义寡核苷酸和siRNA,对其进行必要修饰,以提高实用价值,并从分子和细胞水平研究对靶基因表达的调控.合理选择反义寡核苷酸;用热力学模型的方法筛选了12个针对DRIM以及3个针对S蛋白基因的预测自由能比较低的反义寡核苷酸.异核苷修饰的杂寡核苷酸性质研究以及对SARS冠状病毒S蛋白基因表达的调节;反义寡核苷酸必须经过一定的化学修饰才能增加特异性、亲和力和稳定性等药用特征.反义寡核苷酸调节肿瘤相关基因DRIM的表达;从12个以DRIM基因为作用靶点的反义寡核苷酸中,经细胞水平初步筛选得到的效果最好的一个,进一步研究对DRIM基因的表达调控.siRNA表达载体的构建以及对肿瘤相关基因DRIM表达的调节;运用PBS/U6质粒作为siRNA的表达载体,搜寻DRIM基因AUG起始密码子下游GG序列,针对第一章筛选的有效反义寡核苷酸相对应的位置,选择3个部位作为候选的siRNA靶位点,克隆构建siRNA表达载体,通过转染Hela细胞,研究对DRIM基因的表达调节.
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