论文部分内容阅读
目的:建立一种快速、灵敏度高、专属性强的大鼠血浆中人参皂苷Rb1,Rb2,Rb3,Rc,Rd,Re,Rf,Rg1,Rg3和Rh1的UFLC-MS/MS联测的定量分析方法,测定注射用益气复脉(冻干)在正常组、假手术组和慢性心衰模型组大鼠体内血药浓度,评价各组药代动力学特征,并比较各组间药代参数特征差异。方法:本次实验大鼠血浆样品采用waters Oasis HLB 1cc固相萃取小柱法进行预处理,,建立大鼠血浆中注射用益气复脉中10种人参皂苷成分(包括人参皂苷Rb1,Rb2,Rb3,Rc,Rd,Re,Rf,Rg1,Rg3和Rh1)的UFLC-MS/MS定量分析方法,样品经Waters Acquity UPLC HSS T3(100 mm×2.1 mm,i.d.,1.8μm)色谱柱分离进入质谱,采用电喷雾离子源(ESI),以乙腈-0.1%甲酸水为流动相进行梯度洗脱,艾司唑仑作为内标,采用多反应监测(MRM)正离子模式进行分析。采用冠状动脉结扎法建立大鼠慢性心力衰竭模型,应用上述分析方法对正常组、假手术组及慢性心力衰竭模型组大鼠静脉注射给予临床等效剂量注射用益气复脉(冻干)后,对不同时间点上述10种人参皂苷成分的血浆药物浓度进行测定,运用DAS.3.0软件获得10种人参皂苷成分的药动学参数,比较各组间差异。并运用基于药时曲线下面积(AUC0-∞)自定义权重系数的方法进行整合药代动力学的分析,计算各组不同时间点所对应的综合人参皂苷的血浆药物浓度,运用DAS3.0计算相关药动学参数,并比较各组间差异。结果:药代动力学实验中,运用建立的大鼠血浆中10种人参皂苷成分的UFLC-MS/MS定量分析方法,检测正常组、假手术组合慢性心衰模型组经益气复脉注射给药后的人参皂苷的血药浓度,经过基于AUC0-∞的自定义权重系数整合后药代动力学参数为:正常组平均AUC0-t(μg/m L·h)、AUC0-∞(μg/m L·h)、Tmax(h)、Cmax(μg/m L)分别为43608.81±8243.20,48549.713±10257.6,22.46±4.56,3371.6±871.00;假手术组平均AUC0-t(μg/m L·h)、AUC0-∞(μg/m L·h)、Tmax(h)、Cmax(μg/m L)分别为37517.97±2326.14,42781.85±4237.05,24.12±3.93,3917.17±686.10;慢性心衰模型组平均AUC0-t(μg/m L·h)、AUC0-∞(μg/m L·h)、Tmax(h)、Cmax(μg/m L)分别为44637.70±11153.08,50440.69±11246.88,23.45±1.42,3787.54±1254.21。结果经益气复脉静脉给药后,三组大鼠血浆中主要药动学参数AUC0-t,AUC0-∞,T1/2,CLz等经T-test检验没有显著性差异(P>0.05)。结论:本实验建立了注射用益气复脉中10种人参皂苷的UFLC-MS/MS联测方法,该方法具有灵敏度高、快速高效、重现性好等优点,可准确对大鼠血浆中所含10种人参皂苷成分进行定量分析,可用于注射用益气复脉在大鼠体内的药代动力学研究;本次药代动力学研究可提示,在疾病状态下(如慢性心力衰竭),机体对注射用益气复脉中人参皂苷成分的代谢基本无影响,同时为注射用益气复脉的临床研究提供数据支持。