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鼻腔直接与外界接触,病原微生物可通过鼻腔入侵机体。提高鼻腔黏膜免疫力有利于防止病原微生物的入侵,如何提高鼻腔黏膜免疫力成为大家关注的焦点。鼻相关淋巴组织(nasal-associated lymphoid tissue,NALT)位于呼吸道入口处,是鼻腔免疫的重要位点。枯草芽孢杆菌是一种需氧菌,能够迅速消耗机体呼吸道消化道中的游离氧,抑制病原菌的生长。已有研究发现枯草芽孢杆菌作为一种免疫增强剂能有效地增强肠道的先天免疫,但枯草芽孢杆菌对猪的鼻腔有何影响尚不清楚,我们推测它能够提高鼻腔黏膜免疫力,因此做了以下研究:1.猪NALT发育的形态学研究扁桃体是NALT的重要组成部分,它们形成一道抵御病原入侵的免疫防线,在鼻腔免疫防御中具有特殊的战略作用。本试验应用组织学方法研究猪出生后扁桃体的变化,结果表明猪出生时扁桃体中有弥散性淋巴组织,但没有淋巴滤泡聚集。7日龄时,软腭扁桃体中出现淋巴滤泡。50日龄时鼻咽扁桃体中出现次级淋巴滤泡。鼻咽扁桃体和软腭扁桃体树突状细胞(dendritic cells,DCs)、CD3+T细胞及IgA分泌细胞在前21天增长较快。猪的NALT在抵御病原入侵的局部免疫中发挥重要作用,了解猪NALT的发育对进一步研究猪鼻腔免疫有重要参考价值。2.枯草芽孢杆菌喷鼻后在猪NALT中的分布为了研究枯草芽孢杆菌喷鼻后,枯草芽孢杆菌在猪NALT中分布情况,本试验选取6只1月龄三元杂交猪,随机分为空白对照组(n=3)和枯草芽孢杆菌组(n=3),用Dylight 488标记的枯草芽孢杆菌(108 cfu/nostril)喷鼻后2h,可以在鼻黏膜、鼻咽扁桃体和软腭扁桃体固有层观察到枯草芽孢杆菌。用CD11b对DCs标记后发现,CD11b+DCs中有Dylight488标记的枯草芽孢杆。此结果表明枯草芽孢杆菌可以到达鼻黏膜、鼻咽扁桃体和软腭扁桃体固有层,且可以被CD11b+DCs 摄取。3.枯草芽孢杆菌喷鼻对猪NALT中免疫细胞的影响为了研究枯草芽孢杆菌作为一个益生菌如何刺激局部黏膜免疫,本试验选取8头新生仔猪,随机分为空白对照组(n=4)和枯草芽孢杆菌组(n=4),分别于猪3、12、21日龄时用枯草芽孢杆菌喷鼻,3日龄时200μl/鼻孔枯草芽孢杆菌(1010 cfu/ml),12日龄时500μl/鼻孔,21日龄时1000μi/鼻孔。28日龄时注射戊巴比妥钠安乐死处,采集鼻黏膜和扁桃体样品。结果显示喷鼻枯草芽孢杆菌后,鼻黏膜、鼻咽扁桃体、软腭扁桃体中T细胞、IgA分泌细胞、DCs显著增加(P<0.05)。枯草芽孢杆菌喷鼻后猪NALT中IL-1β,TNF-α及IL-8的mRNA表达量及蛋白表达量与对照组相比未发生显著差异。结果提示,枯草芽孢杆菌喷鼻引起猪鼻黏膜和扁桃体免疫细胞数量增加的同时,不引起明显的炎症反应。枯草芽孢杆菌喷鼻后 NALT 中 TLR(toll-like receptor,TLR))-2 和 TLR-9 的 mRNA 表达量及蛋白表达量显著提高(P<0.05),刺激了猪局部黏膜的先天免疫。