【摘 要】
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研究目的:骨骼肌是人体运动系统的重要组成部分,其质量的改变与骨骼肌蛋白质平衡调节失衡有关,当骨骼肌蛋白质分解大于合成时便会导致骨骼肌萎缩发生,该过程与两种泛素连接酶密切相关,即肌肉特异性环指蛋白1（Mu RF1）以及肌萎缩Fbox-1蛋白（MAFbx）。过去的研究发现,一次性力竭运动会促进骨骼肌中ROS生成和增加Mu RF1与MAFbx m RNA表达量。然而,NADPH氧化酶（Nox）源的ROS
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研究目的:骨骼肌是人体运动系统的重要组成部分,其质量的改变与骨骼肌蛋白质平衡调节失衡有关,当骨骼肌蛋白质分解大于合成时便会导致骨骼肌萎缩发生,该过程与两种泛素连接酶密切相关,即肌肉特异性环指蛋白1（Mu RF1）以及肌萎缩Fbox-1蛋白（MAFbx）。过去的研究发现,一次性力竭运动会促进骨骼肌中ROS生成和增加Mu RF1与MAFbx m RNA表达量。然而,NADPH氧化酶（Nox）源的ROS是否可以直接影响Mu RF1与MAFbx的蛋白表达尚不清楚,氧化应激导致的骨骼肌萎缩信号通路有待进一步研究。因此,本研究以SD大鼠一次性力竭运动为模型,联合使用ROS上游调控分子Nox的抑制剂与蛋白激酶C（PKC）的抑制剂进行干预,研究基于PKC/Nox途径的氧化应激对骨骼肌泛素连接酶蛋白表达的影响。研究方法:体重180-220g的雄性SD大鼠24只,分为4组,每组6只（n=6）,分别为对照组（C组）、运动组（E组）、运动+PKC抑制剂组（EP组）、运动+Nox抑制剂组（EN组）;在正式训练前1天和前1小时,EP组注射白屈菜红碱（5mg/kg）、EN组注射罗布麻宁（10mg/kg）、E组和C组注射等量生理盐水;三组运动大鼠进行一次性跑台力竭运动（25m/min）,力竭后即刻取大鼠跖肌;采用荧光探针（DCFH-DA）检测ROS、比色法测骨骼肌丙二醛（MDA）、Western Blot法检测PKC、Nox2、Nox4、Mu RF1以及MAFbx蛋白表达。研究结果:1)与C组比,E组大鼠跖肌ROS水平显著增加（P＜0.05）;与E组比,EP、EN组大鼠跖肌ROS水平显著下降（P＜0.05）。2)与C组比,E组大鼠跖肌MDA含量显著增加（P＜0.01）;与E组比,EP、EN组MDA含量显著降低（P＜0.01,P＜0.05）。3)与C组比,E、EP、EN组大鼠跖肌PKC蛋白表达增加（P＜0.01,P＜0.05）。4)与C组比,E组大鼠跖肌Nox2、Nox4蛋白表达增加（P＜0.01）,EP、EN组大鼠跖肌Nox4蛋白表达增加（P＜0.01）;与E组比,EP、EN组大鼠跖肌Nox2蛋白表达降低（P＜0.05）。5)与C组比,E组大鼠跖肌Mu RF1、MAFbx蛋白表达显著增加（P＜0.01,P＜0.05）;与E组比,EP与EN组Mu RF1、MAFbx蛋白表达显著降低（P＜0.01,P＜0.05）。研究结论:1)力竭运动刺激大鼠跖肌ROS与MDA生成,腹腔注射PKC抑制剂chelerythrine或Nox抑制剂apocynin都可抑制其下游ROS的生成,减少大鼠体内的氧化应激反应,从而减少MDA生成。2)力竭运动上调大鼠跖肌中PKC的蛋白表达。3)力竭运动上调大鼠跖肌中Nox2和Nox4蛋白表达,腹腔注射PKC抑制剂chelerythrine或Nox抑制剂apocynin都可有效下调力竭运动大鼠跖肌中Nox2的蛋白表达。4)力竭运动上调大鼠跖肌中泛素连接酶MAFbx、Mu RF1蛋白表达,该过程与PKC/Nox途径的氧化应激密切相关。
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