拟南芥IQM1介导茉莉酸信号转导的机制研究

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IQM1(AT4G33050)属于IQM家族,是1个含有IQ基序的钙调素结合蛋白。本实验室前期研究发现IQM1有可能通过对JAZ的调控介导JA信号转导,从而参与植物抗病。本文对IQM1在JA信号中的位置做了进一步确定,同时也对IQM1介导JA信号转导的机制进行了探究,得到如下结果:1.突变体iqm1-1对Pst DC3000的抗性强于野生型Col;双突变体iqm1-1myc2-2的抗病性与myc2-2基本一致,且都强于Col和iqm1-1;iqm1-1 coi1-2的抗病性与coi1-2也基本一致,且明显强于其他基因型植株。2.利用RT-qPCR分析了茉莉酸反应抑制子JAZ(jasmonate ZIM-domain)家族12个成员的基因表达。结果显示,相对于野生型Col,iqm1-1中JAZ1基因表达下调;相对于JAZ1超表达植株JAZ1-GUSOE,双突变体iqm1-1JAZ1-GUSOE中JAZ1基因同样明显下调。3.水处理下,双突变体iqm1-1 JAZ1-GUSOE幼苗中的GUS活性几乎不存在,也就是JAZ1-GUS融合蛋白的含量几乎为0;用26S蛋白酶体抑制剂MG132处理后,JAZ1-GUSOE幼苗中的GUS活性有所增强,但是iqm1-1 JAZ1-GUSOE幼苗中的GUS活性仍然没有变化。4.JAZ1超表达植株JAZ1-GUSOE和双突变体iqm1-1 JAZ1-GUSOE的染病情况基本一致,从各方面指标来看,染病程度明显低于iqm1-1和Col。5.植株喷施Pst DC3000后的0 h、1 h和3 h时,Col、iqm1-1、JAZ1-GUSOE和iqm1-1 JAZ1-GUSOE 4种基因型植株的气孔开度并无明显差异以及可见的规律性变化。6.将RIP所得样品反转录为cDNA,外送公司测序。根据测序结果,得到4个候选靶标基因。经过PCR验证,使用AT3G41768(编码rRNA)和ATCG00020(编码光系统II反应中心蛋白A)的引物进行PCR时扩增出了特异性条带。上述结果表明,IQM1介导茉莉酸信号参与植物抗病依赖于MYC2或COI1的存在,且可能并不是通过直接调控JAZ1。IQM1蛋白可能具有结合rRNA或者结合编码光系统II反应中心蛋白A的RNA的能力。
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