论文部分内容阅读
利用酵母酶系催化一磷酸腺苷（AMP）磷酸化生成三磷酸腺苷（ATP），是最有工业前景的ATP生产方法之一。稳定细胞质量、掌握反应机理、优化生产控制和提高赡效益是目前ATP工业化生产急待解决的问题。本文针对存在的问题，从基础研究出发，选用一株具有较高ATP生产活力的酵母菌株，对影响酵母培养的环境因素、酵母的通透性与ATP生产活性的相关性进行了较深入的探讨和试验研究，系统地探索了酵母细胞酶系合成ATP的反应机理，同时，对应用活性炭吸附和离子交换树脂分离作了基础性研究。 在现有酵母培养工作中，对培养基中的酵母膏、（NH4）2SO4、K2HPO4、葡萄糖四种因素不同浓度水平进行正交实验，研究其对培养酵母菌浓及 AMP转化活性的影响，确定了用于ATP生产的酵母细胞培养工艺的最佳配方，其结果为：m（葡萄糖）=4％，m（酵母膏）=0．5％，m（K2HPO4）=0．2％，m（（NH4）2SO4）=0．15％。 考察了丙酮处理、日光曝晒以及自然干燥三种酵母处理方法的AMP转化率，并且与新鲜酵母的AMP转化活性进行了比较，结果发现酵母需经过通透化处理后才具有AMP转化活性。 研究了利用酵母酶系生产ATP的反应机理，考察了多种因素对AMP转化情况的影响，结果表明：酵母酶系催化AMP转化为ATP的反应受到不同因素的影响，AMP转化反应首先是葡萄糖的酵解和含能磷酸化合物的积累；糖的磷酸化反应优先于AMP的磷酸化反应；Mg2+为有关酶的激活剂，高雌的Mg2+对反应转化率的影响不大，其它因素的最佳条件为：n(葡萄糖卜=150mmo l/L、n（磷酸缓冲液）=200mmol/L、p（酵母量）＝50g/L、搅拌速率为75r/min、温度35℃、PH=7．0。 查阅有关文献，对ATP的分离与纯化提出了探索性步骤，并对某些影响ATP提取效果的因素进行了初步研究，得出一系列有用的实验数据。