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目的本研究对山东省青岛市白血病、骨髓增生异常综合征及淋巴瘤患者外周血EB病毒(Epstein-Barr virus,EBV)阳性标本中RPMS1基因的多态性进行检测,旨在了解青岛市EBV阳性恶性血液病病人EBV编码基因RPMS1的变异特征,并探讨RPMS1基因变异与白血病、骨髓增生异常综合征及淋巴瘤发生发展的关系。方法选取山东省青岛市恶性血液病病人891例和健康成人93例做为研究对象,采用PCR技术检测白血病、MDS、淋巴瘤病人外周血和健康成人咽漱液中EBV Bam HⅠ-W片段以筛选EBV阳性标本;EBV阳性标本进一步采用巢式PCR和DNA测序技术,检测EBV阳性恶性血液病病人外周血和健康成人咽漱液中RPMS1基因序列,根据其特征性突变和系统进化树对基因变异进行分类,并与同一地区健康人群咽漱液中RPMS1变异类型的分布进行比较。结果(1)从白血病、骨髓增生异常综合征、淋巴瘤患者外周血和健康人咽漱液标本中检出EBV阳性标本共391例,其中白血病标本中检出137例(30.38%),骨髓增生异常综合征标本中检出56例(32.56%),淋巴瘤标本中检出114例(42.54%),健康人咽漱液标本中检出84例(90.32%)。(2)391例EBV阳性标本均完成测序分析,共发现5种RPMS1亚型,即RPMS1-A、RPMS1-B2、RPMS1-C、RPMS1-E和RPMS1-F。(3)RPMS1-A型为主要亚型,在281例EBV阳性标本中检测到,RPMS1-A型的基因序列除个别散在的突变外,基本与标准株B95-8序列一致。RPMS1-A型在健康人咽漱液标本中的比率显著高于急性髓细胞性白血病、霍奇金淋巴瘤和非霍奇金淋巴瘤患者(P<0.05),但健康人咽漱液标本与急性淋巴细胞白血病、慢性白血病和骨髓增生异常综合征中RPMS1基因型的分布无明显差异(P>0.05);RPMS1-A亚型在不同恶性血液病之间分布差异无显著性(P>0.05)。(4)RPMS1-B2亚型以P50L突变为特征,在健康人咽漱液标本的比率显著高于急性髓细胞性白血病、慢性白血病、骨髓增生异常综合征、霍奇金淋巴瘤和非霍奇金淋巴瘤(P<0.05)。但健康人咽漱液标本与急性淋巴细胞白血病中RPMS1基因型分布差异无显著性(P>0.05)。RPMS1-B2亚型在不同恶性血液病之间的分布无显著差异(P>0.05)。(5)RPMS1-C以D51N突变为特征。RPMS1-C型在健康人咽漱液标本的比率显著低于急性髓细胞性白血病(P<0.05),与其他5种恶性血液病无明显差异(P>0.05)。RPMS1-C亚型在急性髓细胞性白血病的比率显著高于急性淋巴细胞白血病、慢性白血病、骨髓增生异常综合征、霍奇金淋巴瘤和非霍奇金淋巴瘤(P<0.05),且RPMS1-C亚型在非霍奇金淋巴瘤的比率显著高于骨髓增生异常综合征(P>0.05)。(6)RPMS1-E亚型分为RPMS1-E1和RPMS1-E2,分别以S65N突变和T85R突变为特征。RPMS1-E亚型在健康人咽漱液标本的比率显著低于慢性白血病和非霍奇金淋巴瘤(P<0.05),与其他4种恶性血液病无明显差异。RPMS1-E亚型在慢性白血病的比率显著高于急性淋巴细胞白血病、急性髓细胞性白血病和骨髓增生异常综合征(P<0.05)。(7)RPMS1-F亚型又分为RPMS1-F1和RPMS1-F2,分别以S98G突变和S101I突变为特征。其中RPMS1-F1亚型在健康人咽漱液标本中的比率显著低于急性淋巴细胞白血病(P<0.05),与其他5种恶性血液病无明显差异(P>0.05)。而RPMS1-F2在健康人咽漱液标本的比率显著低于慢性白血病、骨髓增生异常综合征、霍奇金淋巴瘤和非霍奇金淋巴瘤(P<0.05),与急性淋巴细胞白血病和急性髓细胞性白血病无明显差异(P>0.05)。RPMS1-F2在急性淋巴细胞白血病的比率显著低于慢性白血病、骨髓增生异常综合征、霍奇金淋巴瘤和非霍奇金淋巴瘤(P<0.05),在霍奇金淋巴瘤的比率显著高于急性髓细胞性白血病、慢性白血病、骨髓增生异常综合征和非霍奇金淋巴瘤(P<0.05)。结论(1)序列除个别散在突变外与标准株B95-8序列基本一致的RPMS1-A型是青岛地区EBV的主要亚型。(2)RPMS1-B2亚型和RPMS1-C亚型分别表现为P50L突变和D51N突变,其中RPMS1-C可能与MDS的发生有关。(3)RPMS1-E型最少,以S65N突变和T85R突变为特征,该亚型可能与慢性白血病的发生有关。(4)RPMS1-F基因型以S98G突变和S101I突变为特征,可能与霍奇金淋巴瘤的高危险性有关。