论文部分内容阅读
目的缺血-再灌注(ischemia-reperfusion,I/R)损伤是临床一种常见的病理生理过程。胰腺是对缺血损伤最为敏感的组织之一,因此胰腺也是最易出现I/R损伤的器官。本研究旨在探讨VEGF单克隆抗体(VEGFMCAb)对胰腺缺血-再灌注损伤的保护作用及其机制。方法采用血管夹阻断大鼠腹腔干和肠系膜上动脉法制备胰腺缺血-再灌注模型,实验对象为健康雄性SD大鼠70只,随机分为A组(手术对照组,10只),B组(缺血再灌注组,30只),C组(VEGF单克隆抗体干预组,30只),B组和C组按缺血时间再分成15min、30min、60min三个时间点组,每组10只。B、C组建立胰腺缺血再灌注模型,C组于缺血前5分钟尾静脉注射VEGFMCAb 100μg/300g;B组于缺血前5分钟注射等量生理盐水;A组作麻醉、开腹、不阻断血流。应用ELASA法检测VEGF、TNF-α表达,并应用凋亡原位标记检测(TUNEL)胰腺细胞凋亡,RT-PCR,Western Blot和免疫组织化学染色检测胰腺组织中Fas,FasL mRNA和蛋白的表达情况。结果B组血清中的TNF-α、VEGF表达明显高于C组(p＜0.01)。B组胰腺组织中了UNEL染色见典型的细胞核固缩及凋亡小体形成。应用VEGF单克隆抗体后,胰腺组织中胰腺细胞凋亡指数明显下降(p＜0.01)。和B组相比,胰腺组织中Fas、FasL mRNA和蛋白表达水平均明显降低,免疫组化亦显示Fas,FasL在VEGF单克隆抗体组中显色弱于B组(p＜0.05)。结论VEGF单克隆抗体可以降低I/R过程中TNF-α、VEGF表达水平,并且抑制Fas的表达抑制过度凋亡,减轻缺血-再灌注对胰腺的损伤。