p21及p27基因表达与原发性肝细胞癌关系的病例对照研究

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目的:探讨抑癌基因p21及p27在原发性肝细胞肝癌(Hepatocellular carcinoma(HCC))患者及健康人群全血中的表达水平及两者之间的关系,探索全血中p21和p27基因的表达水平与HCC患者临床病例资料之间的关系,为肝癌高危人群的筛查以及对其进行一、二级预防提供依据。方法:本研究以HCC患者作为病例组,就诊于医院体检中心体检的健康人群作为对照组,采集患者及对照组的年龄、性别等一般信息,患者的肝炎病史、饮酒史、吸烟史、饮食习惯、受教育程度、职业等信息。采集患者肿瘤的详细资料,包括:肿瘤大小、数目、是否有门静脉癌栓、是否有肝硬化、是否合并门静脉高压等。以研究对象的外周全血作为标本,提取全血中的总RNA,对RNA进行反转录形成第一链c DNA,以c DNA作为模板,以GAPDH为内参对照进行PCR扩增,应用q PCR(Quantitative Realtime-PCR)的方法对PCR进程进行实时检测,了解样本中p21基因和p27基因的相对表达量,并对两者的相关性进行分析,同时分别对比这两种基因的相对表达量与肝癌患者临床病例资料的相关性。采用SPSS13.0统计学软件进行数据处理,计数资料采用卡方检验,计量资料采用均数?标准差表示,经正态性和方差齐性检验后数据均符合正态分布且方差相等,故采用独立样本t检验。p21基因和p27基因的相对表达量相关性采用Pearson相关性分析。P<0.05为差异有统计学意义。结果:p21m RNA在HCC患者外周全血细胞中相对表达量为0.27?0.03,健康人群的外周血白细胞中相对表达量为0.05?0.029,p21基因在病例组的相对表达量较对照组高,差异有统计学意义(p<0.05)。通过对病例组临床资料和p21基因相对表达量比较可知,饮酒,HBV感染,术前AFP值与p21基因相对表达量相关,差异有统计学意义(p<0.05),p21基因相对表达量与年龄、性别、吸烟、门脉高压、肿瘤个数、肿瘤大小、有无包膜、肝硬化、合并门静脉癌栓均无关(p>0.05)。p27m RNA在HCC患者外周全血细胞中相对表达量为0.69?0.059,在非肿瘤病人的外周全血细胞中相对表达量为0.07?0.0048,p27基因在HCC组的相对表达量较对照组高,差异有统计学意义(p<0.05);p27基因相对表达量与病例组临床资料比较可知,p27基因相对表达量与年龄、性别、饮酒、吸烟、HBV感染,术前AFP值、门脉高压、肿瘤个数、肿瘤大小、有无包膜、肝硬化、合并门静脉癌栓均无关(p>0.05)。病例组和对照组中p21基因和p27基因的m RNA相对表达量相关关系显示,病例组(r=-0.44)呈负相关关系,对照组(r=0.197)呈正相关关系,但相关系数均接近0,故两基因相关关系不大,有待于增加样本量做重复实验证实。结论:(1)p21基因和p27基因在原发性肝细胞癌患者外周全血中表达水平升高,提示p21基因和p27基因的表达水平可能与原发性肝细胞癌发生发展相关,检测其全血中表达水平有望成为肝癌发病的早期预测指标。(2)饮酒,乙肝病史,术前AFP水平能够使p21基因m RNA表达水平升高。
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