Leptin在小鼠放创复合伤随意皮瓣愈合过程中表达的实验研究

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Leptin既是脂肪细胞分泌的多效细胞因子,也是一种分泌型的蛋白质类激素,可以通过受体介导的信号途径发挥作用,也可通过自分泌和放分泌方式直接作用于周围的组织器官发挥作用。Leptin具有多种生理功能,如:控制饮食和促进能量消耗、促进血管新生和细胞增殖,免疫功能,促进生殖和促进性成熟及促进骨改建等。近年来leptin的研究热点是其对伤口的促愈作用,开放性伤口单独外用leptin能明显缩短伤口愈合时间(从原来的5-7d缩短到3-4d)。Leptin促进伤口愈合的机制主要包括以下几方面:1)参与伤口愈合早期的炎症反应;2)刺激内皮细胞分泌血管紧张素Ⅱ,促进愈合早期的血管收缩;3)促进Ⅰ胶原和Ⅱ胶原的合成;4)促进血管内皮细胞的增殖,刺激微血管形成,促进血管再生;5)促进角化细胞的有丝分裂,促进上皮愈合;6)诱导血管内皮生长因子(VEGF)、转化生长因子(TGF)-β1和纤维生长因子(FGF)-β等致转移因子的释放,通过细胞因子之间的相互作用促进伤口愈合。近年来,随环境的污染加剧,肿瘤的发病率普遍上升,手术切除肿瘤进行皮瓣移植联合术前术后放疗是治疗肿瘤的主要方式,这种治疗方式造成医源性的放创复合伤发病率逐年增加,因而对放创复合伤的皮瓣愈合研究也越来越多的受到关注,但至今没有良好的解决方法。Leptin能促进单纯伤口加速愈合,但其对于放创复合伤的愈合是否具有促进作用目前尚未知。研究leptin能否促进放创复合伤皮瓣的愈合成为我们关注的热点,也就是本实验的目的。方法:选取雄性昆明小鼠,30±3g,进行随机分成4组:对照组,创伤组,放射组,放创组。所有小鼠背部去毛,创伤组和放创组的小鼠在背部制备出2.5cm×2.0cm大小的矩形随意皮瓣,皮瓣游离端位于髂棘之上1cm,蒂设计在尾端。放创组于术后3天采用5Gy的电子线对小鼠进行局部皮瓣照射。放射后对实验小鼠每日进行大体观察,记录皮瓣愈合时间及被毛再生时间,分别于放射后1d,2d,3d处死各组小鼠8只,取皮瓣游离端进行HE染色及免疫组化实验。结果:1)本实验采用5Gy的电子线对脱毛的昆明小鼠进行背部皮瓣的局部照射,成功制备了小鼠局部放创复合伤模型。2)本实验首次发现leptin在放射后的浆液腺泡细胞中呈强阳性表达,而在放射后的粘液腺细胞中呈弱阳性表达。3)本实验首次发现Ob-Rb在放射后的浆液腺泡细胞中呈强阳性表达,而在放射后的粘液腺细胞呈弱阳性。4)在低剂量电子线照射下,放创复合伤的leptin在1d~3d的表达量逐渐增加,1d,2d。3d同时间点的leptin在放创组分别高于单创组,高于放射组和对照组,放射组高于对照组。结论:实验中leptin在放创复合伤初期反应性升高,认为其可能对组织起保护作用,促进放创复合伤愈合。
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