正交设计下电针“降脂方”对高脂血症大鼠刺激参数的研究

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目的选取“中脘”,“曲池”,“丰隆”三穴作为针刺降脂处方,在正交设计下使用电针频率(2HZ,50HZ,100HZ),时间(10min,20min,30min)和针刺频次(1次/d,1次/2d,5次/6d),研究其对高脂血症大鼠刺降脂作用,从而筛选出最佳刺激参数。在此基础上,观察电针对血脂异常大鼠脂联素(ADPN)与超敏C反应蛋白(Hs-CRP)的影响,进而探讨“降脂方”对调节动脉粥样硬化(AS)的可能机制。方法实验一将130只健康清洁级SD雄性大鼠随机分为11组:正常组(n=20);模型组(n=11);治疗组为9个亚组,即Ⅰ~Ⅸ组(n=11)。正常组,每天喂养基础饲料;其余各组,每日定量予以高脂饲料,饮水不限,连续自由饲养7周。3周末,于正常组选取10只,其他组各选一只,空腹24h后腹主动脉取血并检测TG、TC、LDL-C及HDL-C的含量,观察造模是否成功。造模成功后,将治疗组Ⅰ~Ⅸ组大鼠即刻按L9(34)正交表设计安排针刺治疗,连续针刺4周后取材。检测各组大鼠TC、TG、LDL-C和HDL-C的含量,光镜下观察肝脏变化。实验二将30只大鼠随机分为空白对照组、模型组、降脂方组,各组10只。空白组喂养普通饲料,模型组和降脂方组给与高脂饲料。空白组自由喂养,模型组抓取,针刺组选取在实验一基础上筛选出的最优刺激参数,4周后采用检测采用化学发光法检测各组大鼠脂联素(ADPN)与超敏C反应蛋白(Hs-CRP)。结果1.造模3周末,模型组与正常组相比,大鼠血清TC及LDL-C的含量明显升高(P<0.05),HDL-C的含量降低(P<0.05),TG含量降低(P>0.05),说明血脂异常大鼠模型制备成功。治疗后,模型组TC、TG及LDL-C的含量仍高(P<0.01),HDL-C的含量降低(P<0.01),说明实验期间大鼠一直处于血脂异常状态。2.电针干预组方能改善大鼠毛色、粪便等一般情况。电针干预后食用高脂饲料大鼠血清TC、TG、HDL-C含量降低,LDL-C含量上升。正交试验结果显示,腧穴“降脂方”对大鼠TC的最佳刺激参数为100HZ,5次/6d,10min。对大鼠TG的最佳刺激参数为50HZ,10min,5次/6d。对大鼠HDL-C的最佳刺激参数为50HZ,1次/d,10min。对大鼠LDL-C的最佳刺激参数为100HZ,20min,1次/d。而各因素(电针参数)的顺序为TG:频率、留针时间、频次;HDL-C和TC:频率、频次、留针时间;LDL-C:频次、频率、留针时间。4.光镜下观察:模型组大鼠肝脏可见肝细胞胞浆内聚集大量脂滴,发生脂肪变性,细胞中度至重度肿胀,部分细胞膜消失,相互融合,HE染色呈大小不一的空泡状,肝小叶正常结构破坏。各电针组肝细胞均有不同程度的修复,各电针组之间肝细胞修复程度未见明显差异。3.与正常组相比,模型组大鼠Hs-CRP的含量升高(P<0.05),ADPN明显降低(P<0.05)。电针干预后,“降脂方”组与模型组相比,Hs-CRP含量降低(P<0.05),ADPN明显升高(P<0.05)。结论1.电针“降脂方”能改善大鼠毛色、粪便等一般情况,调节TG、TC、HDL-C和LDL-C的水平,修复肝细胞,最佳刺激参数组合为:100HZ,10min,1次/d。2电针“降脂方”最佳刺激参数,能有效降低Hs-CRP水平,提高ADPN水平,认为腧穴“降脂方”有效调节血脂,改善心血管功能,降低动脉粥样硬化风险。
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