目的: 本研究以死亡相关蛋白激酶(death-associated protein KinaSe，DAPK)为靶点，构建一个含有DAPK的C末端编码序列的质粒，并将此重组质粒转染SH-SY5Y细胞，并观察稳定表达DAPK蛋白C-末端多肽(DAPK carboxylic terminal peptide，DCTP)的SH-SY5Y细胞抵抗谷氨酸诱导凋亡能力，检测DAPK表达水平以及磷酸化水平，初步探究DCTP抑制DAPK功能的机理，为利用DCTP治疗神经元凋亡性脑疾病提供理论依据。 方法: 以DAPK的cDNA为模版，通过PCR扩增出DCTP核酸片段，定向连接到融合质粒pEGFPN1上，把重组质粒转染到SH-SY5Y细胞中，RT-PCR鉴定转染效果，荧光显微镜下观察DCTP表达产物在细胞中的定位。构建表达DCTP的真核表达质粒载体pIRES2-DCTP。利用脂质体将重组质粒转染至SH-SY5Y细胞中，同时转染空载质粒作为对照，用G418筛选细胞克隆，建立稳定增殖细胞株，RT-PCR鉴定DCTP表达。用不同浓度的谷氨酸作用于SH-SY5Y细胞，观察谷氨酸对细胞生长的影响；然后选择适合浓度的谷氨酸，分别诱导转染空载pIRES2质粒的SH-SY5Y细胞和转染pIRES2-DCTP的细胞，观察两组细胞对谷氨酸的敏感性，用Western blot检测两组细胞谷氨酸处理后DAPK表达量以及磷酸化水平的变化。 结论: 成功构建了pEGFPN1-DCTP融合质粒和pIRES2-DCTP真核表达质粒，并把两个质粒分别成功转染入SH-SY5Y细胞中。DCTP的表达产物定位在细胞质中。DCTP可以抵抗谷氨酸诱导的SH-SY5Y细胞凋亡，但是不影响DAPK的表达水平和磷酸化水平，其抑制凋亡的机理可能是通过与DAPK全长序列竞争底物或者激活物，或者DCTP肽段反折覆盖了DAPK的活性区域(如锚蛋白重复序列或死亡结构域)。