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目的：为解决组织工程骨血管化缓慢,新骨生长迟缓等问题,在构建组织工程骨时不仅需要植入有成骨潜能的干细胞,而且同时植入加速血管形成的血管内皮祖细胞。本研究在体外情况下,联合培养骨髓间充质干细胞和血管内皮祖细胞复合部分脱蛋白生物骨,构建组织工程骨,植入骨缺损动物模型,分析成骨情况,并探讨移植后免疫排斥反应情况。方法：(1)新西兰大耳兔24只,每组12只,分别建立新西兰大耳兔双侧和单侧胫骨缺损模型,建立模型后1天、3天、1周、2周、4周、12周行CT检查,比较两种骨缺损模型的可靠性和和可行性。(2)新西兰大耳兔48只,分为四组,每组12只,A组：自体BMSCs+自体EPCs+PDPBB组；B组：异体BMSCs+异体EPCs+PDPBB组；C组：单纯PDPBB组；前三组建立骨缺损模型后分别植入组织工程骨,D组为空白对照组。术后3天、7天、2周、4周、8周流式细胞术检测外周血T淋巴细胞亚群CD3CD4和CD3CD8,比较各组CD4/CD8值；术后3天、7天、2周、4周、8周酶联免疫法检测各组外周血IL-1、IL-6、GM-CSF、M-CSF、TNF含量；术后4周、8周、12周HE染色组织病理学观察。(3)新西兰大耳兔36只,A组：自体BMSCs+自体EPCs+PDPBB组;B组：异体BMSCs+异体EPCs+PDPBB组；C组：单纯PDPBB组,建立骨缺损模型后分别植入组织工程骨,术后4周、8周、12周进行大体解剖观察、CT检查、HE染色、Masson染色,采用LeicaQwin图像分析系统对各组HE切片进行骨组织计量,得出骨长入率,采用Adobe Photoshop7.0软件的魔棒工具和直方图(histogram)功能,对Masson染色组织切片进行胶原组织形态计量分析,分析各组组织工程骨的成骨性能。结果：(1)单侧骨缺损组11例无骨缺损变形移位,术后12周未出现骨缺损的愈合,双侧骨缺损组建立模型失败11例,原因均为出现单侧或双侧骨缺损变形移位,出现时间多集中于5天之内,以术后2天为最多,4-8周后逐渐出现畸形愈合。(2)异体组1例动物于术后7天出现术区皮肤破溃约0.5cm,红肿,破溃口与骨移植区域相通,可见移植骨片,于移植术后14天死亡,分泌物培养无致病菌,其余各组动物术后情况均好。异体BMSCs+异体EPCs+PDPBB组骨移植术后各个时间点CD4/CD8值均高于对照组(P<0.05),差异有统计学意义；自体BMSCS+自体EPCs+PDPBB组术后3天、7天CD4/CD8值高于对照组(P<0.05),差异有统计学意义、其余时间点与对照组比较,差异无统计学意义；单纯PDPBB组各个时间点与对照组比较,差异均无统计学意义。异体BMSCs+异体EPCs+PDPBB组的IL-1、IL-6、GM-CSF、M-CSF、TNF含量在各时间点均高于对照组(P<0.05),差异有统计学意义；自体组3-7天高于对照组(P<0.05),差异有统计学意义,其时间点与对照组相似(P>0.05),差异有统计学意义。单纯PDPBB组各个时间点与对照组比较,差异均无统计学意义。异体BMSCs+异体EPCs+PDPBB组术后4周、8周、12周HE染色组织切片均可见移植骨支架周围大量间质淋巴细胞、单核细胞浸润。其余各组无明显间质淋巴细胞、单核细胞浸润。(3)植入后12周大体解剖观察：自体BMSCs+自体EPCs+PDPBB组：缺损区修复组织色泽、质地同正常骨,移植物与周围宿主骨融为一体,与周围骨难以区分,骨修复外观愈合良好。异体BMSCs+异体EPCs+PDPBB组：组织工程骨与周边骨组织基本融合,部分区域可见孔隙,成骨效果差于自体组。单纯PDPBB组：骨缺损区仍可见较多缺损孔隙。CT检查结果：自体BMSCs+自体EPCs+PDPBB组植入后8周：骨缺损已模糊不清,可见较多骨形成充满骨缺损处；植入后12周：骨缺损边界已无法辨认,可见明显髓腔内骨塑形及皮质骨塑形,胫骨表面平整光滑,修复区新生骨组织塑型好,从各个不同侧面观察与正常胫骨形态接近、并融为一体。异体BMSCs+异体EPCs+PDPBB组植入后12周：可见较多密度不均的骨形成充满骨缺损处,但较周围胫骨增高。单纯PDPBB组植入12周：骨缺损区仍清晰可见,但其中隐约见有少许高密度组织填充。术后12周组织病理结果：自体BMSCs+自体EPCs+PDPBB组周可见大骨支架被大量的骨小梁替代,其内可见血管；异体组支架破坏降解严重其内仍可见间质淋巴细胞、单核细胞浸润,新生血管极少见；单纯PDPBB组未见新生血管及骨小梁。术后4周、8周、12周自体组的骨长入率显著高于异体组和单纯PDPBB组(P<0.01),异体组高于单纯PDPBB组,差异有统计学意义(P<0.01)。自体组骨胶原量在各个时间点均高于异体组及对照组,术后4-8周骨胶原量上升最明显。结论：(1)兔单侧胫骨缺损动物模型可行性及稳定性均较好,可以做为本实验的动物模型；兔双侧胫骨缺损模型不适用于本实验研究。(2)自体BMSCs和自体EPCs联合培养复合PDPBB移植骨缺损术后未见明显排异反应；异体BMSCs和异体EPCs联合培养复合PDPBB移植骨缺损术后出现排异反应；PDPBB可做为组织工程骨支架,未引起免疫排斥。(3)自体BMSCs和自体EPCs联合培养复合PDPBB构建组织工程骨具有很好的修复骨缺损能力,其成骨效果明显好于异体联合培养细胞构建的组织工程骨。