中国明对虾雌性蛋白的纯化方法及性质研究

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利用常规层析法(SephadexG-150和DEAE-Cellulose-32)以及一种改进方法(EDTA—Mg2+沉淀、电洗脱)两种途径纯化了中国明对虾的成熟卵巢中的卵黄蛋白,利用电洗脱法纯化了其卵和幼体中的卵黄蛋白。对卵巢中卵黄蛋白的研究表明:该蛋白是一种糖脂磷类胡萝卜素蛋白,总分子量为409 ku,等电点为5.4,含糖量8.7%,具有5个亚基(202 ku、171 ku、105 ku、80 ku和73 ku),亚基之间有1个二硫键。卵中的卵黄蛋白总分子量为404 ku,有6个亚基(202 ku、188 ku、171 ku、105 ku、80 ku和66 ku);幼体(N4期)体内卵黄蛋白总分子量为390 ku,有5个亚基(202 ku、188 ku、171 ku、105 ku、80 ku)。从卵巢到卵再到无节幼体N4期,卵黄蛋白的亚基组成是变化的,其间可能经过了亚基重排或者其他修饰过程。 制备了中国明对虾卵黄蛋白的抗血清并运用免疫学方法从成熟雌性中国明对虾血淋巴中检测到了卵黄蛋白原。利用层析(DEAE—Cellulose—32)或改进方法——EDTA—Mg2+法对中国明对虾血淋巴处理后再用电洗脱法纯化了中国明对虾的卵黄蛋白原。中国明对虾卵黄蛋白原是一种糖脂磷类胡萝卜素蛋白,总分子量为476 ku,等电点5.2,含糖量11.6%,具有3个亚基(171 ku,94 ku,80 ku),亚基之间未发现二硫键。卵黄蛋白原比卯黄蛋白更加不稳定。 分别用柱层析(DEAE—Cellulose—32)砷电洗脱法提纯了克氏原螯虾卵巢的卵黄蛋白。克氏原螫虾卵黄蛋白也是一种糖脂磷类胡萝卜素蛋白,总分子量为481 ku,等电点为5.6,含糖量19.8%,具有6个亚基(198 ku、176 ku、132 ku、111 ku、92 ku、82 ku),亚基之间有1个二硫键。比较了中国明对虾卵黄蛋白和克氏原螯虾卵黄蛋白部分生化性质的异同。
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