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目的:探讨差异表达的miRNA在胃泌素促进大肠癌细胞中作用机制,并分析在大肠癌治疗中可能存在的临床意义。方法:应用酶联免疫吸附法(ELISA)对各标本中GAS的含量进行检测,得到43例标本中胃泌素的浓度,从中选取胃泌素表达阳性的癌组织、癌旁组织以及胃泌素表达阴性的癌组织、癌旁组织标本各1例,选择丹麦Exiqon公司生产的第六代芯片技术对所选取的的癌组织标本进行miRNA芯片扫描,得到荧光强度图片,再利用扫描仪配套的GenePix pro V6.0荧光信号处理软件对原始数据进行分析运算,将所得结果进行比较,筛选出具有明显差异的miRNA,最后在所得到的表达差异的miRNA中选取明显上调表达和下调表达的miRNA各3例进行实时定量逆转录PCR(real time PCR)验证。结果:本课题组前期利用ELISA法对标本GAS含量测得的结果如下:GAS含量在50.00pg/g以上的9例,200.00pg/g以上的2例,分别为226.10、202.20pg/g;50.00到200.00pg/g之间的有7例,分别为178.85、156.10、122.85、118.70、93.95、76.55、51.65pg/g;其余34例未测得GAS含量。利用miRNA基因芯片对各组标本进行检测,差异表达在3倍以上的miRNA作为纳入标准,其中胃泌素表达阳性的癌组织与癌旁组织比较,上调表达的有349个,下调表达的为108个,胃泌素表达阴性的癌组织与癌旁组织比较,上调表达的有212个,下调表达的为61个。胃泌素表达阳性与阴性的癌组织差异基因中,上调表达的有159个,下调表达的基因有77个,胃泌素表达阳性、阴性的癌组织中差异基因与胃泌素表达阳性、阴性的癌旁组织的差异基因相比较,最终得出的差异miRNA,上调的22个,下调的有12个。从中分别选取明显上调表达和下调表达的miRNA各三个,运用Real-time PCR技术验证。Real-time PCR得到的表达强度通过与内参进行比较和转换,所得到的荧光定量PCR结果与芯片分析结果基本一致。结论:1、胃泌素表达阳性大肠癌中存在差异的miRNAs。2、发现了以前尚未报道过的miRNAs,可能在胃泌素表达阳性的大肠癌中发挥着重要作用。