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本研究基于核rRNA基因ITS序列、叶绿体DNA基因间隔序列psbA-trnH和trnL-trnF鉴定湘西宏成制药公司不同栽培基地的泡桐,通过HPLC法检测泡桐叶熊果酸和木犀草素的含量及其不同月份中的含量变化,用GC-MS法测定泡桐叶片、复方桐叶烧伤油及其调剂芝麻油的化学成分,为泡桐优势品种的选育和药物质量的控制提供实验依据。 用3对特异性引物经PCR从泡桐总DNA中分别扩增出600bp的ITS序列、550bp的psbA-trnH序列和900bp的trnL-trnF序列,用ClustalX7.0软件和MEGA3.1软件对DNA序列进行了相似性比较及系统发育分析。结果显示已登录的毛泡桐ITS序列与1号和2号基地泡桐的相似性高于95％,与3号、4号基地和吉首大学校园泡桐的相似性低于80%;毛泡桐trnL-trnF序列与1号和2号基地泡桐的相似性均为99.5%,与3号、4号基地和吉首大学校园泡桐的相似性都低于70%;而4个基地和吉首大学校园泡桐psbA-trnH序列的相似性都高于99%。结果表明,1号和2号基地泡桐可能是毛泡桐,3号、4号基地和吉首大学校园泡桐可能是白花泡桐。 通过HPLC法比较湘西宏成制药公司4个基地和我国部分地区泡桐叶熊果酸和木犀草素的含量,同时检测6月至9月4个基地泡桐叶熊果酸和木犀草素含量的变化。所采用的色谱柱为Shim-Pack C18(4.6mm×150mm,5μm),测定熊果酸的流动相为甲醇-0.5%乙酸溶液(85:15),流速为1.0mL/min,检测波长210nm;测定木犀草素的流动相为甲醇-水-乙酸(60:39:1),流速为1.0mL/min,检测波长350nm。结果表明,4号基地泡桐叶熊果酸和木犀草素的含量显著高于其他3个基地的泡桐,而且7月份的泡桐叶熊果酸和木犀草素的含量最高。 用乙醇、氯仿和正已烷等不同有机溶剂对泡桐叶、复方桐叶烧伤油及其溶剂芝麻油进行提取,用GC-MS法测定提取物的化学成分。结果表明,复方桐叶烧伤油的主要化学组分来自于生产原料泡桐叶和芝麻油且生产过程中未发生变化,这些化学组分中含有促进人体皮肤渗透力和携药能力的亚油酸和棕榈酸,维生素E、植醇及角鲨烯等具有抗氧化作用的化学成分。