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目的:检测Twist2在人脑胶质瘤细胞系中的表达情况;观察Twist2是否影响恶性胶质瘤细胞的侵袭和迁移作用,探讨Twist2是否通过上皮-间质转化(Epithelial-mesenchymal transition,EMT)发挥作用。方法:1、首先运用q-PCR、Western blot检测Twist2基因和蛋白在四株恶性人脑胶质瘤U87、U118、H4、SHG44细胞系中的表达情况;2、选取上述细胞系中Twist2基因和蛋白表达水平最高的SHG44细胞系为研究对象。用沉默Twist2基因质粒的慢病毒感染恶性胶质瘤SHG44细胞系。将实验分三组:第一组:空白组(Blank);第二组:Twist2沉默阴性对照组(NC-sh);第三组:沉默Twist2基因组(Twist2-sh);运用q-PCR、Western blot分别检测各组细胞Twist2 mRNA和蛋白表达情况。3、Transwell小室侵袭法、迁移法检测各组细胞侵袭迁移能力;CCK8法检测各组细胞的增殖能力变化;流式细胞术检测各组细胞的凋亡情况。4、利用免疫荧光法在激光共聚焦显微镜下检测各组细胞NF-κB-p65蛋白的核转位情况。5、Western blot检测各组细胞EMT相关蛋白E-cadherin、N-cadherin、Vimentin和Fibronectin蛋白表达水平。结果:1、Twist2 mRNA和蛋白在人恶性胶质瘤细胞系U87、U118、H4、SHG44中均有表达,且在人恶性胶质瘤SHG44细胞株中的相对表达量最高。2、慢病毒转染恶性胶质瘤细胞株SHG44成功,Twist2 m RNA和蛋白表达水平达到分组要求。3、恶性胶质瘤细胞株SHG44沉默Twist2组细胞侵袭、迁移能力明显减弱,对增殖能力无影响,细胞凋亡率增加。4、恶性胶质瘤细胞株SHG44沉默Twist2组细胞NF-κB-p65蛋白的核转位情况无明显变化。5、沉默Twist2基因后恶性胶质瘤细胞中EMT相关蛋白E-cadherin、N-cadherin、Vimentin、Fibronectin蛋白的发生变化,上皮标志物E-cadherin表达水平升高,差异有统计学意义;间质标志物N-cadherin、Vimentin、Fibronectin蛋白表达水平下降,差异有统计学意义。结论:1、Twist2mRNA和蛋白在多种人恶性胶质瘤细胞系(U87、U118、H4、SHG44)中存在表达;2、Twist2可以促进恶性胶质瘤SHG44细胞株的侵袭和迁移能力,并可能通过EMT影响恶性胶质瘤细胞的侵袭和迁移能力;3、Twist2可以增强恶性胶质瘤细胞的抗凋亡能力。