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目的:血管平滑肌细胞是构成血管的重要细胞，在正常生理条件下表现为高分化的收缩表型以及极低的细胞增殖率，多种生长因子、分裂素、炎性介质、机械应力的改变以及急慢性血管损伤等会导致其被大量激活并发生明显的表型改变，开始生长、增殖、迁移以及合成大量的细胞外基质，导致动脉粥样硬化等心血管疾病的发生。 我国传统中药中有大量的活血化瘀药物临床用于治疗心血管疾病。金丝桃苷(hyperoside，HYP)是多种传统中药的主要活性成分，如贯叶连翘、夏枯草等。我们前期研究发现金丝桃苷可部分通过ERK/CREB通路调控NR4A1表达而抑制血管平滑肌细胞增殖，但是，仍有其他可调控NR4A1表达的信号通路尚未被发现。因此，本研究旨在深入阐明金丝桃苷抑制血管平滑肌细胞增殖的作用机制，为抗血管平滑肌细胞增殖药物的开发提供科学依据。 方法:1.采用CCK-8法，验证金丝桃苷对于血管平滑肌细胞增殖的抑制作用，检测[Ca2+]i对于金丝桃苷抑制血管平滑肌细胞增殖的影响。2.利用westernblotting和RT-PCR技术检测不同[Ca2+]i下金丝桃苷诱导NR4A1蛋白表达及mRNA水平的差异，以及钙信号通路相关蛋白EGFR、IP3R、PKC、CaMKⅡ的变化。3.采用荧光探针Fluo-4 AM标记，检测金丝桃苷对于血管平滑肌细胞内钙离子浓度的影响。 结果:1.金丝桃苷抑制血管平滑肌细胞增殖的效果随胞内游离钙离子浓度下降而减弱，浓度升高而增强。2.经金丝桃苷孵育后血管平滑肌细胞内Ca2+浓度升高。3.下调[Ca2+]i后，金丝桃苷诱导的血管平滑肌细胞内NR4A1 mRNA水平以及NR4A1蛋白的表达作用明显减弱;[Ca2+]i升高后，金丝桃苷诱导的血管平滑肌细胞内NR4A1 mRNA水平以及NR4A1蛋白的表达均显著增强。4.经金丝桃苷孵育后血管平滑肌细胞内IP3R的蛋白表达及磷酸化水平显著上升，PKC、CaMKⅡ发生磷酸化，EGFR的磷酸化无显著变化。 结论:1.[Ca2+]i可调控金丝桃苷诱导NR4A1的表达作用及抑制血管平滑肌细胞增殖。2.金丝桃苷可能通过明显诱导血管平滑肌细胞内IP3R的蛋白表达及磷酸化水平，促使[Ca2+]i升高，继而激活下游信号通路PKC、CaMKⅡ发生磷酸化。3.金丝桃苷可能通过共同调控CaMKⅡ/NR4A1及PKC/MAPK/NR4A1而抑制血管平滑肌细胞增殖。本研究将为金丝桃苷开发成抑制血管平滑肌细胞增殖新药从而防治多种心血管疾病提供科学依据。