加味桔梗汤提取工艺研究及其对小鼠肺水肿预防效果的评价

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随着抗生素类药物在畜牧业的广泛应用,导致耐药菌株越来越多,细菌的耐菌谱也越来越广,同时给动物食品安全带来了严峻挑战。因此,绿色、无残留的抗菌、抗病毒中草药在兽药生产中具有广阔的应用前景。本试验的目的是对自拟方剂加味桔梗汤(金荞麦40g、鱼腥草25g、桔梗8g、甘草8g)的最佳工业化水提工艺进行研究,并对其油酸导致的小鼠肺水肿的预防效果进行评价,以期用以治疗与呼吸系统有关疾病。本研究的内容包括几个方面:1、对桔梗、甘草、金荞麦、鱼腥草药材进行鉴别。方法为理化鉴别、显微鉴别和性状鉴别,结果均符合《中国兽药典》的标准。2、对4种单味中草药和自拟方剂的水提液进行体外抑菌试验。方法:选择了大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌和副鸡嗜血杆菌这些常见的细菌,牛津杯法测抑菌圈直径,固体培养基连续稀释法测最小抑菌浓度。结果:牛津杯法显示出金荞麦和鱼腥草对大肠埃希菌、铜绿假单胞菌敏感性低,配伍方剂对细菌的敏感性相对较高。固体培养基连续稀释法显示4种中草药和配伍方剂水提液对大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌、副鸡嗜血杆菌四种标准菌株均有抑菌效果,且配伍方剂的最小抑菌浓度相对较低。3、考虑到浸泡时间、料液比、提取时间、提取次数等因素能对水提工艺产生影响,采用L9(34)正交试验表的方法,以浸膏得率、甘草酸含量和芦丁含量为考察指标筛选最佳工艺。结果:加味桔梗汤的最佳水提工艺为共煎煮3次,第一次12倍量的水浸泡2h,煎煮2h,第二次10倍量水煎煮1.5h,第三次8倍量的水,煎煮1h。4、试验小鼠分为对照组、病理模型组和预防组,预防组连续7天以1mL/100g的剂量早、晚灌胃最佳水提工艺提取的加味桔梗汤,其余两组灌胃生理盐水。第八天病理模型组和预防组小鼠尾静脉注射油酸致肺水肿,两天后剖杀,观察肺脏病理变化,比较3组之间肺系数、肺含水量和肺湿重与肺干重比值,并做肺脏的病理切片。结果:加味桔梗汤对小鼠肺水肿有很好的预防效果,组间差异显著。因此,本试验自拟的加味桔梗汤有很好的抑菌效果,筛选出了最佳水提工艺,并能对肺水肿起到一定的预防效果,为临床应用提供了一定基础。
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