烟草黑胫病诱抗物质的筛选及机理研究

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本文研究和评价了水杨酸、二氢茉莉酸丙酯、脱落酸、乙烯利、稻瘟灵、苯丙噻二唑、噻菌灵7种药剂对烟草黑胫病和烟草花叶病的效果,从中选择出了对烟草黑胫病效果较好的药剂-二氢茉莉酸丙酯(PDJ),并测定了PDJ对黑胫病菌的直接作用;在上述试验的基础上,进行了系统抗性试验和不同诱导时间后的接种试验;研究了不同药剂联合作用对烟草黑胫病的控制效果,明确了不同药剂之间的联合作用性质;对筛选出的PDJ诱导烟草抗黑胫病的机理进行了初步探讨。对烟草浸种和苗期喷雾处理结果表明,供试药剂在适宜的诱导时间及浓度下均能诱导烟草对黑胫病的抗性,降低发病率和病情指数,但效果之间存在较大差异;其中PDJ效果最为突出,用100mg/L苗期喷雾处理,诱导后3d、7d接种防病效果都在60%以上,浸种处理效果达70.83%,但对烟草生长有一定的抑制作用。供试7种药剂对花叶病的控制效果一般,其中PDJ和PBZ相对较高,效果仍然在50%以下。测定了PDJ对烟草黑胫病菌的直接作用,包括对菌丝生长、孢子囊产生、游动孢子释放及休止孢萌发的作用,结果表明PDJ浓度在200mg/L以下对病原菌的以上生理过程均没有明显的抑制作用,表明PDJ对烟草黑胫病的控制效果是由于诱导了烟草自身的抗病性,而非直接作用于病原菌。通过局部叶片施药,在未施药部位接种,观察黑胫病的发生发展情况的方法测定了PDJ诱导烟草的系统抗性。结果表明,下部第3片叶施药,第4、第5和第6片接种叶病斑比对照都明显减小,由此说明PDJ诱导烟草对黑胫病的抗性具有系统性。对PDJ处理后不同时间接种黑胫病的发病率、病情指数和防治效果进行了测定,结果表明,药后3d接种对黑胫病的诱抗效果最好,随着用药时间的延长,诱抗效果逐渐降低,但药后15d仍具有51.04%的诱抗效果,至21d时诱抗效果只有12.50%,表明PDJ诱导烟草对黑胫病菌的抗性大约可以持续15d左右。<WP=7>测定了PDJ与其它几种药剂联合作用对烟草黑胫病的效果,结果表明PDJ与其它6种药剂混用除了与ABA混用有一定的增效作用外,其它均表现为相加作用。对几种抗病相关酶活性测定结果表明,施用PDJ可以提高地上部和根部PAL、POD的活性,但根部PAL和POD活性高峰的出现要迟于地上部;接种后烟草PAL和POD活性有较大幅度的提高,但是施用PDJ的烟苗两种酶活性有较长时间的高表达,不施药接种的烟苗酶活性只有短暂的高表达,后迅速降低。PDJ处理对烟草体内CAT活性影响不大。对不同处理烟草叶片病原相关蛋白电泳图谱的分析表明,PDJ处理可以诱导烟草体内某些蛋白的表达,其中Rf值为0.11、0.28和0.57的蛋白表达较为强烈;接种也可以导致烟草体内PR蛋白的表达,但是施药和不施药处理之间差异较大,两种处理都有5条谱带表达,但表达量不同,PDJ处理后接种的烟草5条谱带表达都比不施药接种的烟草强烈。分析了PDJ处理对烟草体内osmotin和CDPK2基因表达的影响,结果表明PDJ处理可以诱导烟草osmotin基因的表达,对CDPK2的表达没有影响。接种也可以诱导osmotin基因的表达,但施药和不施药的烟苗表达情况不一致,施药后接种的烟苗表达时间更长。
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